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目的:Warburg效应描述了肿瘤细胞通过特殊代谢产生大量的乳酸以建立和维持细胞外酸性特征的肿瘤微环境的现象,这种酸性的微环境有助于肿瘤细胞的增殖、侵袭、迁移和血管生成。单羧酸转运蛋白4(Monocarboxylate transporter 4,MCT-4)是肿瘤细胞糖酵解和乳酸产生的关键标志物。但到目前为止,MCT-4在乳腺癌中的作用以及和乳腺癌之间的关系仍然不清楚。本研究旨在探索MCT-4在浸润性乳腺癌中的表达情况及其对临床诊疗的意义。方法:收集经过组织学确诊的145例浸润性乳腺癌患者的一般临床资料、肿瘤TNM状态、雌激素受体(Estrogen receptor,ER)状态、孕激素受体(Progesterone receptor,PR)状态、Ki67指数以及和雄激素受体(Androgen receptor,AR)状态等资料;将上述石蜡组织标本用苏木精-伊红染色法回顾性地检测(选取每个石蜡块中最具代表性的区域),采集直径约为0.6 mm圆柱状核心组织样本制成组织芯片,采用免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)染色的方法检测乳腺癌患者组织的芯片中MCT-4的表达【用IHC评分来判断MCT-4表达的高低计算公式为:根据染色强度(Intensity of staining,IS)(0分,阴性;1分,弱;2分,中度;3分,强)和阳性染色(Area of positive staining,AP)的面积(0分,<5%;1分,5%-25%;2分,26-50%;3分,51%-75%;4分,>75%)的乘积AP×IS作为MCT-4的最终IHC评分,根据受试者工作特征曲线(Receiver operating characteristic,ROC)以IHC评分1.5作为区分MCT-4高低表达的临界值】;收集30例浸润性乳腺癌手术患者的癌组织及配对癌旁新鲜组织,提取蛋白后通过蛋白质印迹法(Western blot,WB)和逆转录实时定量PCR(Reverse transcription quantitative PCR,RT-qPCR)分析MCT-4在乳腺癌和癌旁组织中的表达差异;并选取一株乳腺癌细胞系(MCF-7)进行体外实验来检查MCT-4对乳腺癌细胞增殖的影响【使用Lipofectamine3000用针对MCT-4基因的特定siRNA对MCF-7细胞进行转染,随后用WB确认MCT-4基因沉默效果,为了评估细胞增殖能力,根据制造商的说明进行了Cell Counting Kit-8(Cell counting kit-8,CCK-8)测定,使用微孔板分光光度计测量450nm处的吸光度。接着进行EdU实验,通过用荧光显微镜观察每个样品在三个视野中的平均细胞数来分析细胞增殖】。以上三组实验数据使用SPSS19.0和GraphPad Prism 6.0软件进行统计学整理分析。使用配对t检验比较两组之间的测量数据;通过卡方检验和Fisher检验来分析MCT-4免疫染色与乳腺癌患者临床病理参数之间的关系;同时用Kaplan-Meier方法绘制患者的生存曲线,然后用对数秩检验来预测患者预后;最后使用Cox比例风险模型对生存数据进行单变量和多变量分析,来判断MCT-4不同表达与预后的关系。P值<0.05被认为具有统计学意义。结果:实验结果显示:乳腺癌组织中MCT-4的表达显著高于邻近癌旁组织中的表达(通过分析RT-qPCR和Western blot结果表明);MCT-4高表达与pT状态(P=0.018),雌激素受体状态(P=0.001),孕激素受体状态(P=0.024),Ki67指数(P=0.043)以及和雄激素受体状态(P=0.033)相关;实验还观察到MCT-4表达与病理分级之间密切相关(P=0.030);单因素和多因素生存分析还表明,MCT-4表达和淋巴结受累(P=0.027,P=0.001)是乳腺癌预后的重要独立预测因子;细胞学实验表明沉默MCT-4可显著减弱乳腺癌细胞的增殖;沉默MCT-4大大降低了体外乳腺癌细胞系MCF-7细胞的增殖能力。结论:MCT-4的高表达与浸润性乳腺癌患者的不良预后和乳腺癌细胞的增殖相关,其检测可能成为未来乳腺癌患者预后预测的指标之一,并可能为浸润性乳腺癌的治疗提供一个新的研究途径。