Th17细胞及相关因子异常表达与急性冠脉综合征的关联性研究

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目的冠心病发病机制与分子免疫的相关性,国内外未见详细报道,本研究探究急性冠脉综合征(ACS)患者外周血Th17细胞及相关炎性因子的表达水平,从分子免疫水平证实其与疾病发展的相关性,为冠心病的分子机制及防治提供新思路、开辟新途径。方法收集2016年2月-2017年1月在青岛阜外心血管病医院确诊的冠状动脉粥样硬化患者100例,其中急性心肌梗死AMI(20例)、不稳定型心绞痛UA(20例)、稳定型心绞痛SA(60例)及30例健康体检标本作为正常对照组(HC组)。采集空腹静脉血肝素抗凝,采用流式细胞术检测各组患者Th17细胞比率,ELISA法检测各组血清中Th17细胞相关因子IL-17、IL-21、IL-23、IL-6表达水平,干式免疫荧光法测CRP水平,检测生化指标如酶法检测各组中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCHOL)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、葡萄糖(GLU)、同型半胱氨酸(Hcy)的表达。结果为了研究Th17与ACS的相关性,用流式细胞法对外周血中的Th17细胞进行检测,结果显示,ACS患者(UA组和AMI组)外周血Th17细胞表达水平升高(P<0.05),且AMI组升高水平明显高于UA组(P<0.05),UA组升高水平明显高于SA组(P<0.05),但是SA组与HC组无明显差异(P>0.05)。用ELISA法对Th17主要效应性分子IL-17、IL-21进行检测,结果显示,AMI组IL-17、IL-21表达水平明显高于UA组(P<0.05),UA组升高水平明显高于SA组(P<0.05),SA组与HC组无明显差异(P>0.05)。ELISA法对细胞因子IL-23、IL-6进行检测,结果显示,与对照组比较,各组IL-23、IL-6表达水平均有不同程度的升高,尤以AMI组升高明显,AMI组升高水平明显高于UA组(P<0.05),UA组升高水平明显高于SA组(P<0.05),SA组升高水平明显高于HC组(P<0.05)。对冠状动脉粥样硬化的其他危险因素进行分析,与对照组比较,各组CRP表达水平明显升高(P<0.05),AMI组CRP表达水平显著高于UA(P<0.05),UA组显著高于SA组(P<0.05),SA组升高水平明显高于HC组(P<0.05),差异有统计学意义。与对照组比较,SA组、UA组、AMI组患者血清TCHOL,TG及LDL-C、水平均高于正常对照组(P<0.05),而HDL-C水平均低于正常对照组(P<0.05),UA组、AMI组之间无明显差异(P>0.05);AMI组、UA组、SA组GLU表达水平均较对照组明显升高(P<0.05),但AMI组、UA组、SA组各组之间差异不明显;AMI组Hcy表达水平明显高于UA组(P<0.05),UA组升高水平明显高于SA组(P<0.05),SA组升高水平明显高于HC组(P<0.05),各组之间差异有统计学意义;研究Th17细胞及其效应分子IL-17与其他冠状动脉粥样硬化危险因素的关系,发现Th17细胞、IL-17与TG、TCHOL、HDL-C、LDL-C、GLU、Hcy均无相关性,说明CHD是多因素作用的结果,在ACS的疾病发展过程中,Th17细胞、IL-17不直接参与血糖、血脂、同型半胱氨酸的代谢;对IL-17与IL-21、IL-23、IL-6的相关性进行分析,发现IL-17与IL-23高度相关(r=0.9209,p<0.01)、与IL-6高度相关(r=0.9870,p<0.01);研究可见Th7细胞异常表达IL-17、IL-21是导致急性冠脉综合征发生的主要分子机制,IL-17、IL-23、IL-21、IL-6对ACS的辅助诊断具有指导价值。结论1.本研究证实ACS患者Th17细胞表达明显增高;尤以AMI组增高更为显著。由此表明ACS的发生与Th17细胞活化有关。2.ACS患者Th17细胞相关炎性细胞因子IL-17、IL-21、IL-23、IL-6水平均显著增高,并且IL-17与血清中IL-6、IL-23浓度变化呈正相关,故表明炎性信号通路的开放是ACS发生的主要分子基础。3.ACS患者血清中TC、TCHOL、LDL-C、Glu、Hcy含量升高,说明ACS患者具有内分泌-免疫紊乱,但与Th17细胞、IL-17无直接关联性,ACS是多因素共同作用的结果。4.通过对Th17细胞及其相关细胞因子ROC曲线进行分析,Th17细胞、IL-17、IL-6、IL-23、IL-21可以作为ACS辅助诊断指标。本研究为冠心病的分子免疫机制提供了依据,对该病的诊治具有重要指导价值。
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