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目的：研究miR-155在HBV慢性感染的细胞模型中对免疫应答的调节及其抗HBV作用。方法：1.提取人肝癌细胞株总DNA作为模板,通过PCR扩增miR-155前体序列,酶切后退火连接到pmR-mCherry质粒,构建pmiR-155真核表达载体,然后进行菌落PCR、质粒双酶切和DNA测序鉴定。2.利用脂质体法将pmiR-155真核表达质粒转染到HepG2.2.15细胞,同时设空载组(pmR-mCherry质粒)、转染试剂组、空白组和对照组(HepG2细胞)。转染后24 h荧光显微镜下观察细胞内红色荧光蛋白的表达情况,荧光实时定量PCR检测各组细胞内miR-155表达量。3.重组质粒pmiR-155经去内毒素提取后,转染到人肝癌细胞株。收集转染后各组细胞及细胞培养上清液,应用RT-PCR检测各组SOCS-1 mRNA的变化,Western Blot检测各组SOCS-1蛋白的变化,ELISA检测各组细胞的IFN-Y及IL-2的分泌量变化。4.重组质粒pmiR-155转染到HepG2.2.15细胞,同时设空载组(pmR-mCherry质粒)、转染试剂组、空白组。转染后24h、48h、72h,应用荧光实时定量PCR检测各组细胞内miR-155表达量,化学发光法定量检测细胞培养上清液HBsAg和HBeAg变化,荧光实时定量PCR定量检测HBV DNA拷贝数的变化。结果：1.通过菌落PCR、质粒双酶切及DNA测序鉴定,证实miR-155前体序列成功插入pmR-mcherry真核表达载体,pmiR-155真核表达载体构建成功。2.转染后24h、48h、72h各组细胞进行荧光观察,载体中红色荧光蛋白有较好的表达,转染效率达到50%以上。荧光实时定量PCR结果表明,以空白组为基准,重组载体组细胞内所表达的miR-155明显增加,具有显著意义(P<0.05)。3. RT-PCR结果示：重组载体组SOCS-1 mRNA的表达量(0.63±0.09)显著低于空白组(P<0.05)；Western Blot结果示：重组载体组内SOCS-1蛋白表达量(0.37±0.07)显著低于空白组(P<0.05)；ELISA结果示：以空白组为基准,重组载体组与对照组所分泌的IFN-γ、IL-2水平均显著高于空白组(P<0.05),而空载组及转染试剂组与空白组相似。4.化学发光法结果示：以空白组为基准,转染后重组载体组细胞所分泌HBsAg、HBeAg明显减少,而空载组及转染试剂组与空白组相似。转染后48h重组载体细胞内miR-155对HBsAg和HBeAg抑制最为明显,抑制率分别为(83.96±1.52)%和(79.60±8.71)%。荧光实时定量PCR检测结果示：转染后24h、48h、72h,以空白组为基准,重组载体组中HBV DNA拷贝数明显减少,而空载组及转染试剂组未见明显差异。其中重组载体组内miR-155对HBV DNA的抑制率分别为(51.87±0.36)%、(43.67±1.51)%和(68.21±6.02)%。相关性分析发现miR-155与HBsAg、HBeAg和HBV DNA表达复制呈负相关(r<0)。结论：在HBV慢性感染的细胞模型HepG2.2.15中,过表达的miR-155可通过增强抗病毒免疫效应抑制HBV的复制及表达。