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试验对10个基因型的不结球白菜的花药进行了离体培养,分析了不结球白菜基因型、培养基种类对花药愈伤组织诱导和分化的影响;以YHY—2和YHY—4为材料,研究了不同生长季节、花粉发育时期、培养条件、预处理以及培养基附加物AgNO3对不结球白菜花药再生植株的影响;同时对不结球白菜花药培养获得的再生植株进行了细胞学观察,并研究了植株移栽的方法。 结果表明: (1)不结球白菜不同基因型的花药在培养能力上有差异。供试的10份材料均能在所试的3种诱导培养基中发生愈伤组织,但愈伤组织的分化较为困难,10份材料中只有4份材料能在所试培养基上分化出绿苗,且发生率低,平均绿苗分化率最高的仅为1.515%,另6份材料未发现绿苗的产生。 (2)正反交F1花药的愈伤组织诱导率大致相同。 (3)供体植株的生长环境对花药愈伤组织诱导和分化有一定的影响,春季取材的花药再生植株的频率较秋季高。花粉的发育时期是影响花药培养效果的重要因素。就不结球白菜而言,选取花粉发育时期为单核—双核早期的花药进行培养,能获得较高的愈伤组织诱导率和分化率,而此时花蕾的外部特征是:花蕾纵径长1~2mm,花瓣/花药长1/2,花药呈淡黄绿色半透明。在进行花药培养时愈伤组织诱导阶段一般以暗培养为好,有利于愈伤组织的形成,而强光有利于以后的绿苗分化。以0~4℃的低温预处理花药,花粉可以完成其进行雄核发育所需要的诱导过程,而且绝大部分花粉仍然保持存活,而未经预处理的培养花药诱导过程完成时,大多数的花粉退化死亡。高温(33℃,24hr)处理过的花药,花粉在第一次有丝分裂过程中,出现一定频率的核对称分裂,可明显的提高花药再生植株的诱导率。培养基中补加6~10mg/L的AgNO3可以有效的促进花药愈伤组织诱导率,明显的增加绿苗产量,而抑制愈伤组织根的分化。 (4)通过染色体的鉴定发现,花药再生植株中有二倍体、多倍体和非整倍体的存在。用100mg/L的NAA浸泡花药植株茎基部,可明显提高移栽成活率。