LoMYB8的表达模式分析及遗传转化的研究

来源 :东北林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a83312259
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
长白落叶松(Larix olgensis)是我国东北林区主要速生造林针叶树种之一,非生物胁迫是限制长白落叶松生长的主要的因素之一,为摸清长白落叶松非生物胁迫下的表达模式,挖掘出与抗旱密切相关的基因,并通过基因工程方法对长白落叶松进行遗传改良成为目前亟待解决的问题。本试验对长白落叶松进行模拟干旱胁迫,通过第二代高通量测序技术分析差异表达基因。筛选出9条MYB转录因子全长基因,并对9条MYB全长基因的表达模式进行分析。克隆LoMYB8并对落叶松愈伤组织进行转化,获得抗性愈伤材料。对落叶松实生苗进行28%(W/V)PEG模拟干旱处理,然后对转录组结果进行分析,与胁迫0h对比,胁迫24h、48h、96h后分别有4118个基因、3046个基因和5141个基因表达量发生变化,其中得到注释的基因数量分别占84.31%、80.96%、82.80%。对差异表达基因进行GO富集分析,发现胁迫24h、48h和96h时差异表达基因主要注释为催化能力类和代谢过程类。对差异表达基因深入挖掘,共发现7种转录因子家族32条全长基因,其中数量最多的为MYB转录因子家族,包含9条基因。在干旱、盐胁迫下对MYB转录因子家族的9条全长基因进行表达量分析,发现LoMYB8在干旱、盐胁迫下表达量高于其余8条基因。对LoMYB8基因的表达模式深入分析发现,LoMYB8在落叶松的根、茎和叶中均能表达,在茎中的表达量最高,具有组织表达特异性。在干旱和盐胁迫下,LoMYB8基因在落叶松的不同组织部位中均发生了变化。通过qRT-PCR分析长白落叶松对2,4-D、6-BA、GA3和IAA四种激素处理响应,结果显示LoMYB8基因在不同激素处理时间的表达量总体是上调表达,并且LoMYB8基因处于较高水平表达状态。利用落叶松转录组数据得到的LoMYB8基因全长进行引物设计,从落叶松基因组中克隆出LoMYB8基因,其编码区序列长度为1122bp,编码含有373个氨基酸的蛋白质。根据其同源蛋白质序列比对和系统进化树分析得知,LoMYB8与白云杉ABQ51223.1蛋白的序列一致性最高,亲缘关系最近。将LoMYB8基因构建到pCAMBIA1301载体上,通过农杆菌介导法转化到落叶松胚性愈伤组织中,对所获得的抗性愈伤组织进行了 PCR和荧光定量PCR检测,验证了LoMYB8基因在落叶松愈伤组织中过表达。
其他文献
监督权是宪法和法律赋予人大及其常委会的一项重要权力,对相当多不具有立法权的地方人大而言,监督权是最经常行使的职权,也是最为重要的职权之一,其最主要功能是有效保障法律
观赏桃是原产我国的观赏植物,因其美丽的花型、吉祥的寓意,一直广受人们的喜爱,具有巨大的园林应用潜力。近年来,观赏桃的新品种选育和花期调控方面的一直是研究的热点,而观
随着国际社会全球化的不断深入,企业信息在促成不同跨文化背景的企业合作中发挥着越来越重要的作用,因此对企业信息翻译的研究具有十分重要的意义。本文试图运用彼得·纽马克的交际翻译理论来研究网络供求信息的翻译方法。根据纽马克的翻译理论,交际翻译注重将源语言的重要信息传递到目标语言中,这样做的目的是与目标语言的读者进行良好的沟通。因此,在交际翻译中,译者应努力对目标语读者产生与原语读者相同的预期效果,译文对
土壤是林木生长不可缺失的基质,气候、植被和土地覆盖的变化对其理化性质的影响日益受到重视。大兴安岭林区作为我国东北部的生态屏障,在全球森林生态系统物质循环和动态变化
卡尔.施米特是二十世纪德国最重要的政治理论家之一。他从敌人与朋友的界分来理解政治的概念,并提出了一种关注紧急状态的主权决断论。作为一名反自由主义斗士,施米特继承了
目的:通过整理数据库中中医药治疗子宫内膜异位症的文献,借助中医传承辅助平台,得出目前中医对内异症的辩证治疗思路,为中医经验传承提供参考。材料与方法:以关键词在万方、
经过近年来科技强警工作的持续开展和各级民警的不懈努力,公安部门基本上完成了公安信息管理系统的建设。但是由于公安信息管理系统都架设在公安内网,在外面执勤的民警无法直
目的:通过分析急性和慢性后循环脑梗死的脑干听觉诱发电位变化的特点,并和动脉粥样硬化的相关性比较,初步探讨BAEP在后循环脑梗死早期识别和诊断方面的临床应用价值。方法:本
政党政治是现代政治制度中不可或缺的一部分,政党思想的研究能够为中国的现代化提供思想和理论的支持。在我国的发展中,政党思想研究一直起到了重要的作用,也是研究中国政治发展的重要视域,为近代以来中国政党发展提供了重要注脚。在中华民族复兴的今天,回看中国马克思主义政党思想的确立与传播有着非比寻常的意义。作为我国马克思主义政治学创始人之一的邓初民先生,一生致力于传播马克思主义,在政治学的教学、著述等实践中逐
案例指导制度作为我国司法改革进程中的一项举措,经由启蒙、初建、发展等阶段,是一项区别于大陆法系判例制度、英美法系判例法的制度,在我国法律适用上发挥着重要的作用。而基于刑事案件和民事、行政案件的不同,其指导性案例也在多方面有所区别。在刑事领域,由于刑法的适用会导致人的人身权利、财产权利受到一定程度的剥夺,而刑法的机能是惩罚犯罪与保障人权,因此,罪刑法定原则作为一项不得违背的铁则而存在。因而在刑事领域