核苷类药物中间体的生物转化和纯化

来源 :大连工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:magicylt
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
2’-脱氧腺苷是一种天然的脱氧核苷,它既是生化药物和基因工程研究的重要原材料,又是生产抗肿瘤和抗病毒核苷类药物(克拉曲滨等)的重要中间体,因此在市场上有广泛需求。化学合成法合成2’-脱氧腺苷需要一些基团的保护与去保护以及糖基的活化反应,其步骤过于复杂,且得到的一对对映异构体需要拆分;与传统的化学合成方法相比,微生物转化法具有选择性高、条件温和、成本低和污染小等特点,因此2’-脱氧腺苷的微生物转化研究非常有意义。本文通过筛选得到一株2’-脱氧腺苷的高产菌株—乙酰短杆菌HE-4。首先对HE-4摇瓶培养条件进行了优化,得到最佳发酵培养基配方为:葡萄糖0.2%、玉米浆3.0%,氯化铵0.5%,磷酸氢二钾0.3%,硫酸镁0.075%,氯化钠0.4%,pH7.2;最佳发酵条件为:发酵温度37℃,种子培养16h后按3%接种量接入发酵培养基,发酵培养基采用lOOmL/500mL装液量,于转速210r/mi n时培养24h,菌量比原来提高了一倍多。为得到大量菌体进行下。步转化实验,在摇瓶发酵的基础上进行10L放大实验,得到发酵罐的最佳培养条件为:温度33℃,恒定的pH 6.9,通气量适中约7.5L/mi n,发酵罐培养略优于摇瓶培养。得到高产稳定的菌体后优化转化反应条件,最佳转化条件为:反应温度58℃,菌体添加量6%,转化pH7.2,磷酸盐浓度30mmol/L,反应时间8h,底物比率(A/dT)125%,dT浓度72.8mmol/L,反应转速60r/min,添加0.003%的MnSO4。最后对产物的分离纯化进行了探索,流程如下:将初步处理后的生物转化液用D101柱进行柱层析,上样流速为2.0 mL/min,洗脱剂依次为4.5 BV 0.1mol/L的Na2CO3水溶液、3BV 30%乙醇,流速1.5mL/min,可得到纯度78.7%的dA洗脱液,收率93.9%,将得到的洗脱液进行结晶、重结晶,产品纯度可达99%以上,纯化收率82%。
其他文献
专业课程的改革要结合专业技术的发展、行业的特征,适应社会的需要。就《船舶防火防爆技术》课程,通过对学生层面的调查和结果分析,提出几点建议,以明确课程改革的发展方向。
本文在实验探究的基础上,引进新型材料,改良石墨烯的性能,制备多种结构稳定、性能非常好且在外加磁场存在的情况下,很容易从水中分离的吸附材料,用于吸附重金属离子和染料。(
<正> 如何充分发挥科协的人才优势和网络优势,为党和政府、各部门及企业进行决策咨询,促进决策的民主化、科学化进程,提高决策的正确性和可行性,在新世纪之初,探讨这个问题很
<正> 决策是对一个缺乏确定情境的事物的抉择反应,决策的基本任务是尽可能判明事物本身的不确定性,提出应对方略。咨询就是对不确定情景的事物作出判断、抉择的建议和方案,它
作为中国科协的一项常规活动,年度十大科普事件走过了十多年的历史。对2002—2012年度十大科普事件进行了分类,并分析了这些事件的特点,籍此对未来年度十大科普事件的评选及
科协系统的科技咨询机构是科协下属的事业单位,其发展沿革必然涵括在我国事业单位改革发展进程当中。通过研究我国行政事业单位改革不同发展阶段的特点,深入分析科协系统科技
教育培训评估是教育培训工作的基本组成部分,加强教育培训评估工作的研究及实践,是建立健全教育培训体系、提升培训能力的必然要求。基于柯克帕特里克模型,结合部门行业教育
1955届聿怀校友、被誉为“中国大熊猫之父”的潘文石,在很多人的印象当中,觉得他与一般的科学家不同,因为在他身上能看到更多的传奇色彩:他有着几十年在野外研究熊猫、白头叶
通过对我国体育特色小镇PEST分析,总结当前体育特色小镇发展中存在的不足,并提出体育特色小镇建设的现实意义,为我国体育特色小镇建设提供完善的理论体系,为政府部门、企业和
<正>一、研判形势,准确理解新常态自从习近平总书记首次提出"新常态"的表述,这三个字就成为描述中国进行全面深化改革的热门词汇。那么,什么是"新常态"?它和科协之间的关系是