达玛烯二醇生物合成模块的构建及其与酿酒酵母细胞的适配

来源 :天津大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:David_storm
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
人参作为传统的中药材具有保护心血管,抗疲劳,抗衰老,抗癌,保肝和增强免疫力的药理作用。人参皂苷是中药人参的主要活性成分。目前人参皂苷的生产还主要依赖于植物栽培、植物组织和细胞培养、生物转化的方式;尽管相关研究已取得很大进展,但人参皂苷的生产效率依然不能满足市场的需求。近年来,合成生物学在植物萜类化合物微生物合成上的成功应用,为人参皂苷的微生物合成提供了可行的参考方案。酿酒酵母具有安全、培养方式简单、遗传背景清晰、基因操作成熟、次级代谢有限的优点,是优秀的细胞工厂。由于酿酒酵母的类异戊二烯途径能够提供萜类化合物的重要前体,因此以酿酒酵母为底盘细胞构建合成植物萜类化合物酵母工程细胞具有相对的优势。本文首先构建具有达玛烯二醇合成酶表达模块的酿酒酵母工程菌,然后以提高三萜类化合物前体2,3-氧化鲨烯的积累为目标,通过对酵母类异戊二烯途径的关键基因3-羟基-3-甲基戊二酰CoA还原酶基因Hmg1、法尼基焦磷酸合成酶Erg20、鲨烯环氧酶Erg1进行过表达,对甲基酵母甾醇脱甲基酶基因Erg27进行弱化表达,为三萜类化合物的合成提供良好的平台。生物模块的导入往往会对底盘细胞造成很大影响,甚至抑制底盘细胞的生长,也使得生物合成途径不能有效工作。因此,本文通过对植物源的达玛烯二醇合成酶的基因序列进行密码子优化使其在酿酒酵母细胞中具有更高的转录水平;构建白假丝酵母Erg1的表达载体,以期在蛋白水平对酵母內源关键基因Erg1进行优化;并融合表达达玛烯二醇合成酶和鲨烯环氧酶以实现模块与底盘细胞之间的进一步适配,提高达玛烯二醇的合成水平。酿酒酵母类异戊二烯途径合成细胞所需的多种关键代谢物,存在复杂而精确的调控机制来平衡细胞的需要。因此对该途径的改造相对比较困难。本文对酿酒酵母异戊二烯途径的改造为三萜类化合物的表达提供了平台;并通过构建达玛烯二醇酿酒酵母细胞,对功能模块与底盘细胞进行进一步的适配,为构建达玛烯二醇高产酿酒酵母细胞提供了基础。
其他文献
研制和发展大型客机成为建设创新型国家,提高我国自主创新能力,促进产业转型和增强国家核心竞争力的重大战略举措,客户服务已成为民机产业中相比产品本身更高层次的竞争手段,
永磁同步伺服系统广泛应用于自动化设备中,其控制目标为对给定的指令信号能实现快速响应,跟踪误差小,稳态精度高。伺服系统中振动问题普遍存在,如果不加以抑制,会使设备的精
在新时期文学的谱系中,张承志是一个始终勃发着创造激情与超越冲动的作家。他的小说响应了80年代个性解放的大潮,之后又专攻散文创作。张承志的散文在中国当代散文中算是一面
在传统的过氧化氢漂白中,过氧化氢的分解反应必须在一个高温且强碱的条件下发生。这样的反应条件不仅会消耗大量的能源,而且会导致纤维素纤维强度的下降。通过向过氧化氢水溶液
硫酸软骨素(Chondroitin Sulfate,CS)是一种来源于动物骨骼组织的重要组成成分酸性粘多糖——糖胺聚糖。该物质有很高的实用价值和科研价值,市场前景好。但由于原料和工艺的选
目的探讨高效抗逆转录病毒治疗(HAART)不同治疗方案对人类免疫缺陷病毒(HIV)合并丙型肝炎病毒(HCV)感染患儿肝功能、HIV载量、CD4~+T细胞的影响。方法 40例患者分为齐多夫定(
正弦波驱动永磁电机矢量控制系统以其优越的性能备受国内外学者关注。但是对于诸如电动自行车等存在成本要求的应用场合,高昂的位置传感器、电流传感器、驱动功率模块等成为
目前,我国中学生体质健康的问题日益突出。中学生体质状况的变化,与诸多因素有关,其中影响学生体质健康最重要的方面是体育锻炼开展的数量与质量。初三学生是心理发展和身体
中学语文阅读教学对学生的素质提升有着十分重要的作用和意义。但是在实际教学过程中,虽然教师付出了大量心血、有的学生仍然视野狭窄、思想肤浅,如何摆脱这种事倍功半的尴尬
本文从理论和实证两个层面回答了“广告受何影响”和“广告有何影响”两个问题。理论层面,本文以Ishigaki(2000)的广告竞争模型为基础,一方面将消费者评价和市场规模加入基本