万寿菊花中主要有效成分的盐析萃取

来源 :石河子大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:laoyoutiaosc
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万寿菊(Tagetes erecta L.)是集食用与药用价值于一身的一年生草本植物,具有清热化痰、解毒消肿等活性功能,被广泛的应用于生物制药、化妆品、食品及保健品等多个领域。目前,对万寿菊花中叶黄素的研究报道较多,对于其他成分如挥发油、类黄酮、皂苷及多酚等研究报道较少。本文采用盐析萃取技术从万寿菊花中萃取类黄酮、叶黄素、多酚、还原糖及挥发油,并对万寿菊粗提物进行了初步纯化,实现了多种有效成分的一步萃取及粗分离。首先,研究了两相盐析体系萃取万寿菊花中主要有效成分。考察了溶剂及无机盐浓度、粉碎目数、料液比、静置分相时间、温度及pH对类黄酮、叶黄素及多酚在盐析体系中分配的影响。结果表明,当体系构成为32%(w/w)丙酮/20%(w/w)柠檬酸三钠,料液比为1:40 g/mL,35°C下萃取60 min时,类黄酮、叶黄素及多酚得率分别为6.47、1.41和79.50 mg/g;回收率分别为98.37%、95.22%和95.68%。此外,还对粗提物的抗氧化活性进行了初步研究。其次,研究了微波辅助两相盐析萃取万寿菊花中主要有效成分。考察了微波作用时间、微波功率、料液比及pH等单因素对叶黄素、类黄酮及多酚在两相盐析体系中分配的影响。结果表明,微波辅助可以提高多酚的萃取率,在此基础上,采用响应面法优化微波辅助盐析萃取万寿菊花中多酚的最优提取工艺为:微波辐射95 s,微波功率500 w,料液比1:45 g/mL,粉碎目数160目。在该条件下,获得的粗提物对DPPH·及ABTS·+有明显的清除效果。再次,研究了三液相萃取万寿菊花中主要有效成分。在两相盐析萃取的基础上,考察了疏水性有机溶剂、亲水性有机溶剂及无机盐浓度等因素对萃取的影响。结果表明,叶黄素主要富集于上相,最大得率及回收率分别是14.66 mg/g和98.60%;类黄酮、多酚及还原糖主要富集于中相,最大得率分别为5.32、86.33和38.66 mg/g,最大回收率分别为99.74%、96.42%和97.11%。抗氧化测试表明,与两相盐析及微波辅助两相盐析提取相比,三液相萃取物表现了较强的抗氧化活性。最后,采用大孔树脂分别对三液相上相及中相粗提物进行纯化,并对其成分进行分析。通过静态吸附解析实验探讨了大孔树脂对叶黄素及多酚吸附及解析能力,并考察了样液浓度、洗脱剂类型及洗脱速率等影响因素,得到对叶黄素及多酚吸附解析性能最佳的大孔树脂分别是HZ818及D101。气相-质谱联用分析测定结果表明,万寿菊挥发油中主要成分为6,10,14-三甲基-2-十五酮、肉豆蔻酸、十六酸及二十四烷酸甲酯等。高效液相测定结果表明,万寿菊中多酚类物质主要为香豆酸、丁香酸、对羟基苯甲酸、槲皮素及没食子酸。
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