缢蛏三倍体育种及相关生物学研究

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缢蛏肉味鲜美,营养价值高,还是我国传统应用的海洋药物,100多年来,缢蛏一直是浙江贝类养殖的重要种类之一。但是随着育苗技术的发展和成熟,养殖容量在不断扩大,缢蛏种质资源受到严重的破坏。三倍体贝类具有肉质好、生长快、个体大、产量高等特点。为了使缢蛏养殖业健康发展,有必要通过生物技术手段对其种质进行改良。 本文用6-DMAP抑制缢蛏受精卵第二极体的化学方法诱导三倍体,研究了缢蛏三倍体的诱导条件,技术工艺以及其幼虫的培育方法。同时对缢蛏在个体能量收支、染色体核型排列、亲蛏生殖腺结构等进行了分析讨论。 在三倍体诱导试验中,亲蛏洗净暂养后用温差法对亲蛏催产,收集精卵受精后用不同药物处理浓度和持续时间诱导三倍体,试验结果表明:在100μmol/L-500μmol/L的浓度范围内均可诱导出三倍体,随着药物处理浓度和处理时间的提高,三倍体倍化率和D形幼虫畸形率有不同程度的提高, D形幼虫孵化率会随之下降。浓度为500μmol/L、处理时间30min的处理组中,三倍体倍化率最高。综合考虑笔者认为在浓度为300μmol/L,处理时间为20min时,三倍体诱导效果最佳。 在担轮幼虫期时取上浮幼虫为材料,制染色体片染色观察,选取较好的分裂相显微摄影后放大、记数、统计。试验统计结果表明:缢蛏二倍体的核型为2N=4t+2st+6sm+26m,染色体臂数NF=72,未发现性染色体和随体。二、三倍体的染色体类型基本一致,三倍体只是在染色体数目上比二倍体增加了一套。 缢蛏个体能量收支试验中,选择个体大小基本一致的缢蛏在与实验时相同的水环境下驯化7天。测量实验缢蛏摄食前后饵料浓度、粪便的TPM、POM值、海水中的氨氮含量、溶氧等试验指标。将各指标值转换为能量值。实验结果表明:缢蛏摄食的能量中排粪能占的比例最大为41.1﹪,其次是生长能为30.2﹪,第三为呼吸能占23.75﹪,排泄能所占比例最小为5.64﹪。缢蛏的摄食有较明显的昼夜变化,在晚上22点到凌晨4点的时间段中摄食行为最活跃,以后再逐渐降低,在10点到16点的时间段里降到最低值。 应用透射电子显微和组织切片技术,观察了繁殖期间缢蛏两性生殖系统。结果表明: 缢蛏雄性生殖系统中存在着不同发育时期的生殖细胞,成熟精子是鞭毛型精子,由头部、中段和尾部构成。头部由锥形顶体与细胞核相连而成。6个大小不一的线粒体球围饶在中心粒周围构成精子的中段。中心粒与轴丝相连贯穿鞭毛构成精子的尾部。雌性生殖系统中卵子形状不规则或呈梨形。在滩涂缢蛏的卵质中存在大量的粗面内质网、线粒体、脂滴等细胞器和颗粒。而在蓄水塘缢蛏卵质中观察到数目众多的已退化、空泡状的卵黄颗粒,未观察到大量的粗面内质网存在。
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