天蓝色链霉菌A3(2)是链霉菌的模式菌株,可以产生多种抗生素和其他类型的药用化合物,而且其复杂的形态分化机制和次级代谢调控机制一直都是研究的热点。但是作为工业化生产抗生素的主要菌株,在生产过程中菌体形成大量气生菌丝,从而造成菌体密度过高,消耗大量的营养物质和氧气,使得抗生素产量下降,严重影响工业生产效率。在NCBI网站中被注释为产孢相关蛋白的SCO4114,其功能未知。本课题组前期研究中构建了△sco4114菌株,表型分析表明其气生菌丝生长受阻,通过生物信息学分析表明sco4114为产孢相关s RNA scr4115的靶标基因。本文针对产孢相关蛋白SCO4114功能和调控机制做了更深入的研究。首先,在天蓝色链霉菌A3(2)中构建双质粒表达系统,探究了sco4114和其调控基因s RNA scr4115相互作用关系,发现scr4115显著促进了sco4114的翻译过程,并且其基因间区的双向启动子可以分别驱动scr4115和sco4114的转录。然后,利用i TRAQ定量联合LC-MS/MS质谱在蛋白质组学水平上研究sco4114基因突变对产孢的影响。分析结果表明,在△sco4114菌株中有77个蛋白显著上调,86个蛋白显著下调,这些显著差异表达的蛋白参与碳代谢、ABC转运系统、信号转导及核糖体蛋白等多个代谢和调控途径,并通过对差异蛋白的分析发现SCO4114可能是参与了bld家族基因的调控,进而影响了气生菌丝的形成。同时在大肠杆菌中构建了GST-SCO4114融合蛋白,利用GST pull down技术获得了79个与SCO4114相互作用的蛋白,进一步发现SCO4114蛋白可能直接影响bld KB基因的表达从而影响了天蓝色链霉菌的形态分化。综上所述,通过以上实验对SCO4114的功能做了初步分析,寻找到了多个可能与其具有相互作用的蛋白,拓展了天蓝色链霉菌形态分化的调控机制,对进一步完善天蓝色链霉菌形态分化网络具有重要意义。