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皖南花猪是安徽省黄山市的地方优良猪种之一,具有繁殖率高、产仔多、肉质好等优良特性。脂联素是主要由脂肪组织细胞分泌的一种生物活性物质,与动物的生殖性能有着十分密切的关系。本试验通过测定分析皖南花猪血清中脂联素(Adiponectin, Adp), GnRH和GnIH含量；下丘脑组织中脂联素、脂联素受体(Adiponectin receptor, AdpR)、GnRH和GnIH基因表达量的发育性变化规律及相关性,进而探讨Adp与皖南花猪生殖作用的联系。通过重组脂联素(recombinant adiponectin, rAdp)对小鼠下丘脑GnRH细胞和GnIH细胞的GnRH和GnIH基因表达的影响,探索Adp对下丘脑生殖激素合成的影响。1体内试验：脂联素与GnRH和GnIH在皖南花猪下丘脑组织中的发育性变化及其相关性研究随机选取0d、30d、45d、90d、180d的皖南花猪各10头(公、母各5头)进行试验。ELISA法测定血清中Adp、GnRH和GnIH激素的水平；用FQ-PCR法检测下丘脑组织中Adp、AdpR1、AdpR2、GnRH和GnIHmRNA的表达。结果显示：(1)皖南花猪血清脂联素与GnRH和GnIH水平均有极显著的发育性变化,在30d时脂联素极显著低于其他日龄,而GnRH和GnIH显著或极显著高于其他日龄(P<0.05或P<0.01)。(2)皖南花猪下丘脑组织脂联素mRNA表达量很低,AdpR1、AdpR2mRNA在不同发育阶段的表达量相对稳定(P>0.05),AdpR1mRNA表达量在各个日龄均显著高于AdpR2(P<0.05)。皖南花猪下丘脑组织GnRH、GnIHmRNA发育性变化总体呈下降趋势,GnRH、GnIHmRNA在下丘脑中的发育性变化总体呈下降趋势,GnRH和GnIHmRNA表达量分别在45d和90d最低。刚出生的母猪下丘脑GnRHmRNA表达量显著高于其他日龄(P<0.05)(3)性别间比较发现,公猪AdpR1mRNA在Od, AdpR2和GnRH mRNA在30d显著高于母猪(P<0.05)(4)相关性分析结果：皖南花猪下丘脑组织中AdpR1与GnRH表达量显著负相关(P<0.05)：血清中Adp与GnRH水平显著负相关(P<0.05),母猪Adp与GnRH显著负相关(P<0.05)。GnRH与GnIH含量在公、母猪和总体上均极显著正相关(P<0.01)。以上结果提示：在皖南花猪发育过程中脂联素可能通过内分泌并由AdpR1介导从而抑制GnRH的分泌,而这种抑制主要表现在母猪中。2体外试验：脂联素对小鼠下丘脑细胞生殖激素基因表达的影响选取怀孕18d的小鼠在无菌条件下取胎鼠下丘脑组织分离培养下丘脑细胞。培养5d后用重组脂联素处理,试验设置4h和24h两个时间点,每个时间点设置2μg/ml和10μg/ml两个浓度。FQ-PCR方法检测下丘脑细胞中AdpR1、AdpR2、GnRH和GnIH mRNA表达量。结果显示：(1)重组脂联素对脂联素受体基因表达的影响：2μg/ml的重组脂联素处理4h后AdpR2mRNA表达量极显著下降(P<0.01),其余均无显著变化。此外,下丘脑细胞中AdpR1mRNA表达量显著高于AdpR2的mRNA表达量(P<0.01)：(2)重组脂联素对下丘脑GnRH细胞和GnIH细胞瓶中GnRH和GnIH基因表达的影响：下丘脑细胞加入重组脂联素24h后,10μg/ml组的GnRH和GnIHmRNA的表达量受到极显著的抑制(P<0.01)。加入4h后,两个浓度组对GnRH和GnIHmRNA表达量均无显著的影响(P>0.05)。以上结果提示：脂联素可能由AdpR1介导抑制GnRH和GnIH基因的表达,且脂联素对GnRH和GnIH的调节有一定的剂量效应和时间效应。