益气养阴解毒方治疗晚期非小细胞肺癌的临床及机制研究

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本文从理论研究、临床研究、实验研究三方面,对益气养阴解毒方治疗晚期非小细胞肺癌的临床效果及作用机制进行研究。理论研究方面 肺癌的西医治疗手段有手术、化疗、放疗、靶向及免疫治疗,近年来随着免疫时代的到来晚期肺癌的治疗有了突破性的进展,但仍面临着毒副作用、耐药等问题。中医治疗是肺癌综合治疗不可或缺的一部分,本研究建立在中医理论上,以文献研究为基础,以省名中医的临床经验为参考,围绕“癌毒”理论,提出抗癌解毒法为肺癌治疗之重要法则,并在此理论的指导下,构建了以“益气养阴、解毒抗癌”为治则的益气养阴解毒方,探讨了该方的立法依据以及在非小细胞肺癌中的运用。临床研究方面 目的:评价临床验方益气养阴解毒方联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌的临床疗效及安全性。方法:选取经病理学或细胞学明确诊断的ⅢB或Ⅳ期驱动基因阴性的非小细胞肺癌患者共60例,按照随机分组法,分为治疗组和对照组各30例,对照组采用NCCN推荐的一线标准含铂双药联合化疗方案,治疗组在相同化疗方案的基础上加服益气养阴解毒方。比较两组无进展生存期(PFS)、客观缓解率(ORR)、疾病控制率(DCR),次要研究终点为总体生存期(OS)、体力状态评分、中医证侯积分以及方案的安全性。结果:60例患者均可进行疗效评估,中位的治疗周期为6个周期,治疗组ORR为26.7%,DCR 为 96.7%,对照组 ORR 为 10.0%(P<0.05),DCR 为 86.7%(P<0.05)。中位随访时间18.1个月,治疗组中位PFS 8.2个月,中位OS 20.8个月,对照组PFS 4.7个月(P<0.05),中位OS 14.5个月(P<0.05)。在中医证候的积分及体力状况评分、不良反应等方面,治疗组较对照组有优势。结论:益气养阴解毒方联合了化疗一线治疗非小细胞肺癌晚期患者疗效良好,其不良反应可以耐受,可作为非小细胞肺癌晚期一线综合治疗的新选择。实验研究方面 目的:明确LncRNA SPRY4-IT1在NSCLC组织和细胞系中的表达水平;证实益气养阴解毒方抗肺癌是否通过调控LncRNA SPRY4-IT1介导,明确益气养阴解毒方所调节的LncRNA SPRY4-IT1 下游与肿瘤细胞增殖、侵袭相关的信号蛋白。方法:通过体外实验,运用细胞转染技术干扰肺腺癌A549细胞,借助细胞和分子生物学手段,通过益气养阴解毒方以及过表达的LncRNA SPRY4-IT1干预后,测定肺腺癌A549细胞增殖及克隆形成、细胞凋亡、细胞凋亡周期、细胞迁移能力,并测定LncRNA SPRY4-IT1靶基因、EMT相关E-cadherin、N-cadherin以及Vimentin的基因以及蛋白的表达水平。结果:1.益气养阴解毒方含药血清对肺腺癌A549细胞的增值率有抑制作用(P<0.05),LncRNA SPRY4-IT1靶基因过表达后对A549细胞的增值率有更明显的抑制作用(P<0.01),两者联合后对细胞增殖亦具有明显的抑制作用(P<0.01)。2.益气养阴解毒方含药血清组可以影响A549细胞的凋亡率(p<0.0001);LncRNA SPRY4-IT1过表达质粒组均可影响A549细胞的凋亡率(p<0.001),两者联合后细胞的凋亡率进一步升高(p<0.0001)。3.LncRNA SPRY4-IT1靶基因过表达后A549细胞阻滞在G1期,联合益气养阴解毒方含药血清后细胞阻滞G2期。4.LncRNA SPRY4-IT1靶基因过表达后,LncSPRY4-IT1靶基因、N-cadherin以及Vimentin的基因表达均显著升高(P<0.0001),联合益气养阴解毒方含药血清后,与对照组比较依旧显著性升高。E-cadherin基因表达显著下降(P<0.001),联合益气养阴解毒方含药血清后E-cadherin基因表达升高。结论:1.益气养阴解毒方以及LncRNA SPRY4-IT1对肺腺癌A549细胞具有抑制作用,两者联合同样可以抑制肺腺癌A549细胞的增殖,并且可以抑制A549细胞的迁移。2.益气养阴解毒方以及LncRNA SPRY4-IT1均可以影响A549细胞的凋亡率,两者联合后细胞的凋亡率进一步升高,LncRNA SPRY4-IT1过表达后A549细胞阻滞在G1期,联合益气养阴解毒方含药血清后细胞阻滞G2期。3.LncRNA SPRY4-IT1靶基因过表达后能够促进肺腺癌A549细胞的EMT现象,而益气养阴解毒方含药血清对EMT作用不显著,但是能够改善LncRNA SPRY4-IT1引起的EMT现象。
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