论文部分内容阅读
目的:应用慢病毒介导特异性沉默P27RF-Rho,研究该基因对肝癌细胞侵袭、迁移方面的影响。方法:构建P27RF-Rho RNAi慢病毒载体。慢病毒介导感染肝癌细胞BEL7402。实验分3组:BEL7402空白对照组,Scramble-si RNA阴性对照组,P27RF-Rho-si RNA实验组。Western blot检测P27RF-Rho基因沉默效果及Rho A、Rho C、VEGF、P53、PTEN表达水平;划痕实验检测细胞迁移能力、Transwell小室检测细胞侵袭能力;明胶酶谱实验分析基质金属蛋白酶活性。结果:Western Blot显示P27RF-Rho-si RNA实验组中P27RF-Rho蛋白表达水平低于两个对照组(P<0.05),BEL7402空白对照组,Scramble-si RNA阴性对照组中VEGF、Rho A、Rho C在蛋白水平上表达均高于实验组(P<0.05),P27RF-Rho-si RNA实验组中P53、PTEN表达水平高于两个对照组(P<0.05);明胶酶谱实验发现P27RF-Rho-si RNA实验组细胞中的基质金属蛋白酶活性低于两个对照组(P<0.01);细胞划痕实验显示P27RF-Rho-si RNA实验组细胞迁移能力受到抑制(P<0.01);P27RF-Rho-si RNA实验组穿过Transwell小室生物膜的细胞平均数低于两个对照组,说明肝癌细胞的侵袭能力下降(P<0.01)。结论:慢病毒介导特异性沉默P27RF-Rho,抑制肝癌细胞BEL7402的侵袭迁移。