【摘 要】
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目的:为证实TRAIL对大肠癌细胞的作用效果以及探讨其可能的作用机制,该研究从 人胚胎肝组织中克隆了TRAIL的全长cDNA,经全自动序列分析仪测序证实其序列后,构建了TRAIL的融合
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目的:为证实TRAIL对大肠癌细胞的作用效果以及探讨其可能的作用机制,该研究从 人胚胎肝组织中克隆了TRAIL的全长cDNA,经全自动序列分析仪测序证实其序列后,构建了TRAIL的融合蛋白质粒及四环素调控的真核表达质粒,并将四环素调控的真核表达质粒用脂质体法转染大肠癌细胞株SW620,用四环素诱导TRAIL有效表达后,通过相关显微镜,HE染色及DNA裂解片段等手段分析TRAIL对大肠癌细胞的凋亡的诱导效应;并通过蛋白免疫印迹杂交检测了凋亡细胞中P53和bcl-2蛋白的表达水平,以探讨TRAIL途径中有无这两个蛋白的参与. 第一部分:TRAIL融合蛋白质粒及四环素调控真核表达质粒的构建;第二部分:TRAIL诱导大肠癌细胞的凋亡的研究;第三部分:TRID在大肠癌及正常大肠黏膜组织中表达的研究.结论:1.首次构建了TRAIL的四环素调控真核表达质粒;2.证实TRAIL的表达可受四环素调控,且TRAIL能诱导大肠癌细胞株SW620凋亡;3.从P53和Bcl-2蛋白表达水平,推测P53和Bcl-2未参与TRAIL诱导细胞凋亡的途径;4.证实TRID在大肠癌及正常大肠黏膜组织中均有表达,且表 达水平明显差异.
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