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目的:本研究通过探讨急性髓系白血病中野生型p53基因作为转录因子调控mir-22后介导tet2的机制,探讨三者之间的互作调控功能与分子机制对急性髓系白血病的临床意义。方法:(1)设计mir-22敲低及过表达干扰载体转染K562细胞,采用qRT-PCR法检测mir-22表达水平,以验证细胞转染是否成功;(2)验证细胞转染成功后,于细胞转染48小时后采用Western Blot法分别检测mir-22敲低及过表达下p53、tet2蛋白表达水平,采用qRT-PCR法检测p53、tet2基因表达水平;(3)敲低tet2干扰载体转染K562细胞,采用荧光显微镜观察绿色荧光与qRT-PCR法检测tet2的表达水平,验证转染是否成功。采用qRT-PCR法检测敲低tet2前后p53、mir-22的表达水平;(4)采用CCK-8(Cell counting Kit-8)法分别检测经敲低及过表达mir-22后与敲低tet2后的K562细胞活性;(5)通过流式细胞仪分别检测敲低及过表达mir-22后与敲低tet2后K562的细胞凋亡及对细胞周期调控的影响;(6)采用双荧光素酶基因实验验证p53作为转录因子靶向结合mir-22启动子以及mir-22结合tet2的靶向关系。结果:(1)实验数据表明敲低mir-22后K562细胞的mir-22基因表达率下降80%(P<0.01),而过表达后mir-22的基因表达水平提高9311倍(P<0.001),说明细胞敲低及过表达成功;(2)qRT-PCR及Western Blot检测结果显示:mir-22敲低可促进K562细胞tet2蛋白以及基因的表达、抑制p53蛋白以及基因的表达;mir-22过表达抑制tet2蛋白以及基因的表达、促进K562细胞p53蛋白以及基因的表达;tet2敲低后,结果表明p53基因表达量及蛋白增加,mir-22的基因表达量减少;(3)CCK8检测结果显示K562细胞中mir-22过表达导致细胞增殖率明显降低,而mir-22敲低在48h检测到与对照组相比细胞增值率升高,具有统计学意义;(4)流式细胞仪检测敲低mir-22后细胞停滞于G0/G1期细胞数减少、促进S期细胞增多;过表达mir-22及敲低tet2基因后,停滞于G0/G1期的细胞数增多,抑制细胞肿瘤细胞进行分裂,促进细胞凋亡,以上具有统计学意义;(5)在双荧光素酶检测显示p53+mir-22 promotor-WT组的双荧光素酶活性降低(P<0.01),提示p53抑制mir-22的表达。mir-22 mimics+tet23’UTR组的双荧光素酶活性降低(P<0.01)。结论:(1)在急性髓系白血病中过表达及敲低mir-22均对细胞的增殖、凋亡及细胞周期产生影响,且mir-22对AML的发生发展具有抑制作用;(2)p53靶向作用mir-22,且抑制其表达;mir-22通过tet2 3’UTR端靶向结合tet2;(3)mir-22过表达后可抑制tet2基因表达及蛋白合成,进而促进p53基因及蛋白表达增多导致mir-22表达水平降低;(4)在急性髓系白血病中存在p53/mir-22/tet2通路,这对其发生机制可能具有重要作用,且进一步的深入研究可能对wtp53失活导致的急性髓系白血病寻找新的治疗靶点,开发新的药物改善患者的总存活率及其生活质量,减轻患者的经济负担,为社会创造经济效益。