未开产和开产蛋鸡输卵管组织转录组测序分析及新基因OvoDBβ的研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:myevanlee
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输卵管是雌性动物繁殖系统的重要组成部分,鸡的输卵管不仅是受精卵形成的场所,还是鸡蛋清和蛋壳形成的部位。研究表明蛋清和蛋壳中含有禽类防御素等抗菌成分,在自然环境中保护鸡蛋免受病原微生物的入侵,同时增强胚胎的免疫。本研究对未开产和开产蛋鸡输卵管膨大部和子宫部组织进行转录组测序分析,得到如下结果:1)发掘新基因1579个,其中803个可在现有数据库中得到功能注释。2)筛选出未开产和产蛋两组蛋鸡之间输卵管膨大部组织差异表达的基因1040个,子宫部差异表达基因595个;差异基因注释结果显示,在未开产蛋鸡输卵管膨大部和子宫部高表达的基因主要与生长发育相关,包括细胞分裂、DNA复制与修复以及代谢等。然而,在已开的产蛋鸡输卵管组织高表达的基因则是与跨膜运输、矿物离子转运、蛋白修饰以及机体防御等密切相关。3)本研究侧重分析了防御素在蛋鸡输卵管中的表达,结果发现禽β防御素三个成员基因(Av BD4、Av BD10、Av BD11)以及所有卵防御素基因仅在产蛋鸡输卵管膨大部组织中表达,而Av BD12在两组蛋鸡输卵管组织中无差异表达,然而其他禽β防御素在输卵管组织几乎不表达。这表明了未开产蛋鸡和开产蛋鸡输卵管组织在转录表达水平上存在较大差异;Av BD4、Av BD10、Av BD11以及卵防御素最可能是由输卵管产生并分泌到鸡蛋中发挥作用的防御素。4)对转录组测序数据进行筛选与分析的时候,发现了一个与卵防御素基因具有相同表达模式的新基因(ID:Gallusgallusnew Gene1845)。通过该基因的全长序列克隆、序列分析、组织表达研究、结构分析以及系统发生分析确认该新基因是鸡卵防御素的一员,并将其命名为OvoDBβ。OvoDBβ的体外抗菌研究发现对大肠杆菌(CICC23657菌株)具有抑制作用,而对金黄色葡萄球菌(1679a菌株)无抑制作用。综上所述,产蛋前后的蛋鸡输卵管组织中存在较多与输卵管发育及功能相关的新转录本与差异表达基因,其中有一部分基因目前还未有任何注释,有待进一步发掘。部分禽β防御素以及卵防御素可能由鸡输卵管组织特异性表达产生并分泌到鸡蛋中发挥作用。本研究首次确认OvoDBβ卵防御素基因并发现其对大肠杆菌具有抑制作用。本文为鸡输卵管以及鸡蛋的防御素的进一步研究提供了基础依据。
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