一种新型复合皮肤的实验研究

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目前在临床上治疗大面积深度烧伤的方法是移植刃厚或断层自体皮,但因缺乏足够的真皮成分,常造成疤痕和挛缩,本实验用NaOH消蚀法研制出一种新的真皮基质(ADM),先将其移植于全厚皮肤缺损的大鼠背部创面,外覆盖辐照猪皮保护3周,使其血管化,再在其上移植断层自体皮,经动物实验我们观察到这种新型复合皮肤,可以减少单纯移植刃厚或断层自体皮造成疤痕和挛缩。 本研究共分四部分:第一部分无细胞真皮基质的制备用高渗盐除去异体皮肤的表皮细胞,经戊二醛交联后以低浓度NaOH消蚀以除去真皮中的所有细胞成分,得到无细胞真皮基质。结果:经光镜和扫描电镜观察到,表皮全层和真皮中所有细胞成分都被消除,胶原纤维稍松散,结构完整,排列正常。第二部分无细胞真皮基质细胞培养法生物相容性的评价实验组为无细胞真皮基质和新生大鼠表皮细胞共同培养;对照组只培养新生大鼠表皮细胞。培养24小时后在倒置显微镜下观察,实验组和对照组均可见表皮细胞贴壁良好,为透明的扁平细胞;接种7天后,取出两组细胞爬片95%酒精固定,苏木精染色,光镜下进行观察,可见大量的分裂期细胞;培养期间未见病原微生物的污染,故该无细胞真皮基质无菌、有较好的生物相容性。第三部分无细胞真皮基质皮下包 中文摘要埋试验,取SD大鼠24只,于大鼠背部皮下包埋无细胞真皮基质门.5 XI.scm勺,于术后 1周、2周、3周、4周取材,每次取出6块皮下包埋的无细胞真皮基质。各标本作面积测定,HE染色光镜观察。结果如下:皮下包埋 卜 周者,无细胞真皮基质渐与周围组织粘附,颜色由苍白转红;皮下包埋3*周者,无细胞真皮基质与周围组织紧密枯附,盾晰叶辩;术后 卜 周,包埋的基质面积变化较包埋前无统计学差异o川0引,术后4周包埋的无细胞真皮基质面积较包埋前缩小 J刃刀5)。光镜下术后 卜 周,宿主的淋巳组织细胞、成纤维细胞浸入生长,釉附在胶原纤维上,少量血管内皮细胞浸入基质;术后34周,无细胞真皮基质内较多的血管形成,故可认为无细胞真皮基质免疫原性低,能诱导宿主的成纤维细胞、巨噬细胞浸入生长,为一种新型的真皮替代物。第四部分无细胞真皮基质与自体断层皮片复合移棺的研究,SD大鼠 10只,在其背部卜方造成全厚皮肤缺损的创面*.5 XI.scm2),将无细胞真皮基质移植其上,外用辐照猪皮覆盖保护,使其血管化后在其上移植自体断层皮片,为实验组:在大鼠背部下方造成全厚皮肤缺损的创面门.5 XI.scm勺 其上亘接移植自体断层皮片,为对照组。于术后2周打开创面观察并记录,移植断层皮片成活95%以上者为成活,结果发现两组的成活情况比较无统计学差异瞩>0刀5).术后2周、3周、4周职材作大体形态学观察,组织学检查,结果发现与对照组相比,复合移植区痰痕增生较轻,断层自体皮与无细胞真皮基质复合移植后外观优于单纯断层自体皮移植。本实验结论 中文摘要 女下: 1.高渗盐溶液NaOH-消蚀法,可制备出一种新型无细胞 真皮基质,具细胞外真皮基质的三维结构。 2.该真皮基质无微生物污染,有较好的生物相容性。 3.该真皮基质免疫原性低。 4.该真皮基质可诱导宿主细胞长入,并可以血管化。 5.自体断层皮片在血管化后的无细胞真皮基质上可以成 活。 6.自体断层皮与无细胞真皮基质复合移植后外观忧于单 纯自体断层皮移植。
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