脂肪酶催化合成麦芽糖肉豆蔻酸酯

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麦芽糖肉豆蔻酸酯是一种性能优良的非离子型表面活性剂。目前,糖酯的工业化生产中所使用的都是化学方法。本论文对脂肪酶催化合成麦芽糖肉豆蔻酸酯进行了研究,其主要内容包括以下几个方面:麦芽糖酯的合成,产物的分离纯化及检测,产品的鉴定及结果分析。反应所使用的原料为麦芽糖和肉豆蔻酸,以Novozym435固定化脂肪酶催化酯化反应的进行。由于这是一个可逆反应,水为生成物,所以加入分子筛吸附反应系统中的水,以推动反应向酯化方向进行。考察了反应条件对麦芽糖转化率的影响,主要包括溶剂的选择,反应装置的优化及最适酯化条件的筛选。得到以叔丁醇作为反应介质,当麦芽糖的用量为30mmol/L时,最佳反应条件为:酶添加量35g/L、肉豆蔻酸与麦芽糖摩尔比为6:1,温度70℃,反应时间72h,此时麦芽糖的转化率可达到91.4%。反应时间及原料糖酸比对产品的酯化度有影响。当反应时间为72h,酸糖摩尔比为5:1-6:1时,得到的产品以二三酯为主。建立了产品的薄层色谱(TLC)检测方法,得到最佳条件为:展开剂:氯仿/甲醇/乙酸/水=7.7:1.0:1.0:0.2(v/v),10%磷铜酸乙醇溶液进行喷雾,105℃加热显色10分钟,单酯和二酯的Rf值分别为0.20和0.50。.产物进行了高效液相色谱分析(HPLC),采用的色谱柱为Hypersil GOLD-C18(250mm×4.6mm),流动相为85%甲醇,柱温40℃,RID-10A检测器。对麦芽糖酯产品进行了分离纯化。脂肪酸可以用正己烷萃取离心(5000r/min,15min)脱除,但会使部分糖酯损失。由于糖酯对麦芽糖有增溶作用,麦芽糖很难通过萃取的办法与糖酯分离.对产品进行硅胶柱层析分离(200~300目硅胶,柱50×600mm),采用的流动相即为薄层色谱分析的展开剂,上样量2.0g,15mL收集一管,用高效液相色谱检测以确定各管组分。对产品进行了红外光谱分析,证明合成了麦芽糖肉豆蔻酸酯。并对其进行了液质联用分析,结果表明产物包含了四种酯化度的酯,即单酯、二酯、三酯、四酯。说明在这个反应体系中有合成高酯化度糖酯的可能,并利于生产HLB值范围较宽的产品
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