【摘 要】
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肾脏疾病严重危害人类的健康,给人们带来了生活和经济上负担。肾小球滤过率(Glomerular filtration rate,GFR)是评价肾功能的一个常用指标。胱抑素C(Cystatin C,Cys-C)是衡量
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肾脏疾病严重危害人类的健康,给人们带来了生活和经济上负担。肾小球滤过率(Glomerular filtration rate,GFR)是评价肾功能的一个常用指标。胱抑素C(Cystatin C,Cys-C)是衡量GFR的有效标志物。Cys-C常用检测方法存在弊端。因此,建立一种简单、方便、特异地检测Cys-C的方法具有非常重要的意义。本实验通过噬菌体表面展示技术获得Cys-C的亲和配体。经过三轮淘洗获得目标序列:Q-V-N-G-L-G-E-R-S-Q-Q-M。用人工固相合成方法标记FITC以制得荧光探针FITC-Acp-Q-V-N-G-L-G-E-R-S-Q-Q-M,通过HPLC和MS进行测定,分子量与理论值相符。当Cys-C浓度在0.039μg/mL-2.5μg/mL时,检测的荧光强度与Cys-C浓度符合线性方程:y=182.12 x+33.842,R2=0.9990;当Cys-C的浓度在2.5μg/mL-160μg/mL时,检测的荧光强度与Cys-C浓度符合曲线方程:y=599.3 ln(x)-119.79,R2=0.9964。探针的荧光强度值与Cys-C浓度总体呈正相关。可为肾病早期检测提供一种有效的新方法。
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