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腺苷是腺嘌呤核苷酸代谢的中间产物，在许多器官中当氧供应不足或需氧量增加时腺苷被释放至细胞外液中来调节能量供给和能量需要之间的平衡，实体肿瘤的细胞外液中腺苷被发现有显著的升高，提示了腺苷在肿瘤生长中的作用。腺苷的效应是广泛的和多效性的，腺苷是一种内源性的核苷通过四种膜受体A1，A2a，A2b和A3来调节许多生理过程，腺苷受体广泛分布在全身，其中A2受体被区分为高亲和力A2a和低亲和力A2b受体。目前对于A2b受体的认识落后于其他的受体亚型，主要是由于A2b受体对于腺苷的相对低亲和力，认为与生理相关性很少，最近发现A2b受体有很重要的功能，腺苷A2b受体的激活可能是肿瘤发展的一种新途径，在决定细胞凋亡或细胞增殖中是一个关键性的因素，将会成为肿瘤治疗的新的靶分子。 研究目的 本研究旨在探讨Adenosine A2b receptor在肝癌组织及正常组织中的表达差异及其意义，并通过RNA干涉技术抑制腺苷A2b受体的表达研究其对肝癌细胞系HHCC和HepG2增殖及细胞周期的影响，从而探讨肝癌治疗的新方法。 研究方法 采用免疫组织化学染色方法检测Adenosine A2b receptor在肝癌及正常组织中的表达情况，western-blot方法检测在肝癌组织及正常组织中蛋白水平的表达，Real-time PCR的方法检测肝癌组织及正常组织中mRNA的水平。针对腺苷A2b受体序列设计siRNA的靶序列并构建载体，建立稳定表达干涉载体的HepG2和HHCC细胞系，通过RT-PCR，Western-blotting和克隆形成实验的方法验证干涉腺苷A2b受体效果。采用流式细胞仪分析细胞周期。MTT法测定肝癌细胞系的生长曲线。