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肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma, HCC)是世界范围内尤其是东亚最常见的恶性肿瘤之一,也是致死率最高的肿瘤之一。HCC的发病机制十分复杂,其基因表达具有高度异质性。尽管许多候选的治疗靶点和诊断标志物已经被发现,HCC的病理依然未能完全阐明。参与HCC进展的新的癌基因或者抑癌基因亟待被发现,这对阐明HCC的发病机制和潜在的临床转化都大有裨益。肿瘤基因组最显著的特征之一是其基因组具有不稳定性,造成该现象的关键因素是肿瘤细胞内各种DNA损伤修复相关蛋白的表达紊乱。DNA损伤修复的异常,一方面使得肿瘤细胞基因组积累了大量激活性或者抑制性突变,另一方面使得大量基因出现拷贝数的扩增、缺失导致其表达量的异常。本研究通过大量文献检索和阅读,寻找已被充分证实既可以参与DNA修复的蛋白,之后排除掉其中已在肿瘤领域被深入研究过的,获得了两个在肝细胞癌中尚未被研究和报道的基因一--Microchidia CW型锌指蛋白家族成员2(Microrchidia CW-type zinc finger 2, MORC2)和结构特异性识别蛋白1(Structure Specific Recognition Protein 1, SSRP1). MORC2是一种抑制性的转录因子,并且能够介导DNA损伤修复,其异常表达或者激活参与了胃癌的进展；SSRP1是一种与转录调控、DNA损伤修复以及细胞周期调控相关的蛋白,其在正常成熟组织中表达量极低,而在分化程度较低的组织中则呈高表达。利用GEO的表达谱资源,本研究不仅验证了MORC2和SSRP1都与肝细胞癌的多个病理指标相关,并与患者术后总体生存期以及无病生存期显著相关,可能作为判断肝细胞癌患者预后的标志物；还发现在mRNA水平上,MORC2和SSRP1在肝细胞癌患者的组织中均异常高表达。本研究继而通过对临床样本进行免疫组化及PCR实验,验证了在蛋白水平和mRNA水平上,MORC2和SSRP1在肝细胞癌中呈高表达。本研究还对上述两个蛋白在肝细胞癌中的功能进行了探索。本研究利用了siRNA转染技术及高表达质粒慢病毒包装技术,利用多个肝细胞癌细胞系,建立了上述两个基因的敲低或过表达的的细胞模型,进行了包括CCK-8、平板克隆形成、细胞周期、流式细胞术检测细胞周期、划痕愈合、细胞迁移、细胞侵袭等多个细胞表型的检测。本研究结果提示MORC2和SSRP1能够分别促进肝细胞癌的进展,而抑制MORC2和SSRP1均能抑制肝细胞癌的恶性程度。本研究还利用裸鼠背部成瘤实验及裸鼠尾静脉注射肺转移两个动物模型,通过活体实验进一步证明了MORC2和SSRP1对肝细胞癌细胞增殖和转移的促进作用。之后本研究分别探索了MORC2调控肝细胞癌恶性表型的下游机制以及SSRP1在肝细胞癌中的异常高表达机制：发现抑制MORC2会造成肝细胞癌细胞系HepG2中Hippo信号通路的阻断,提示MORC2推动MORC2进展的可能机制之一是激活了Hippo信号通路；我们还发现nicro-497(miR-497)可以与SSRP1的RN A的3-UTR区靶向结合,外源性高表达miR-497抑制SSRP1的表达,提示SSRP1在肝细胞癌中的过表达很有可能是因为miR-497的低表达。综上所述,我们的研究筛选并证实了MORC2和SSRPl是肝细胞癌进展过程中的关键基因,为肝细胞癌的治疗提供了新的潜在靶点。