三种海洋生物的活性次生代谢产物研究

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海绵作为海洋生物第二大物种,不仅自身产生丰富结构新颖、生理活性强的次生代谢产物,同时其也是海洋微生物最大的宿主,一直是海洋天然药物研究热点之一。大量文献报道海绵及其共附生微生物代谢物中含有丰富结构新颖的次生代谢产物,主要有抗肿瘤、抑菌及抗炎等生理活性。本论文对一种Hyrtios属海绵生物Hyrtios sp.和两株海洋微生物土曲霉Aspergillus terreus和微白黄链霉菌Streptomyces albidoflavus的次生代谢产物进行研究,同时对分离得到倍半萜类和丁烯酸内酯类化合物进行抗肿瘤、抑菌活性研究,以期发现结构新颖、生理活性强的次生代谢产物,为进一步深入研究新型药物提供科学依据。胺基萜醌类其溶液颜色一般多呈红色、紫红色等较为鲜艳的颜色;该类化合物浓硫酸香草醛呈紫灰色。同时,由于其分子结构中末端双键以及醌环中两个羰基的存在,使其核磁信号特征明显。利用以上特征为导向,对采自南海永兴岛附近海域的海绵Hyrtios.sp的二氯甲烷提取物,运用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、凝胶柱色谱以及HPLC等手段追踪分离到13个化合物。运用UV、MS、1D NMR(1H NMR、13C NMR和DEPT)和2D NMR(1H-1H COSY、HSQC、HMBC和NOESY等)波谱技术,结合文献,确定它们的结构分别为19-hydroxypolyfibrospongol A(A1)、nakijiquinone V(A2)、smenospongimine(A3)、smenospongiarine(A4)、sesquiter-penyl-amyl-amino-hydroxy-quinone(A5)、smenospongidine(A6)、dictyoceratin C(A7)、dictyoceratin A(A8)、polyfibrospongol A(A9)、smenospongic acid(A10)、des-hydroxygraci l ioether C(A11)、ergosterol peroxide(A12)、4(3H)-quinazolinone(A13)。其中化合物A1和A2为新化合物,其中化合物A2为含硫萜醌类。并对这两个新化合物进行了细胞毒活性评价,化合物A1对肺癌PC9细胞系表现出微弱活性,IC50值为20 μM,化合物A2对乳腺癌MCF7细胞系有微弱活性,IC50值为40 μM;抗真菌活性评价中,化合物A2对白色念珠菌SC 5314和红色毛癣菌4438有微弱活性,MIC值为25 ug/mL,对须癣毛癣菌4439的MIC值为12.5 μg/mL,化合物A5和A6对须癣毛癣菌4439有较好的抑制作用,MIC值分别为6.25 μg/mL和3.13 μg/mL,此外A5还对红毛毛癣菌4438有较好抑制作用,MIC值为1.56 μg/mL。对南海海绵P.foliascens共附生真菌A.terreus以及极地放线菌S.albidoflavus发酵液的乙酸乙酯萃取物利用硅胶柱色谱、ODS柱色谱以及HPLC等手段进行了分离纯化,运用UV、MS、1D NMR(1HNMR、13C NMR 和 DEPT)和 2DNMR(1H-1H COSY、HSQC、HMBC 和 NOESY 等)波谱技术,结合文献,确定它们的结构分别为分离自真菌的4-demethylacetate-butyrolactone Ⅰ 3-sulfate(B1)、3-hydroxy-5-{methyl}-4-(4-hydroxyphenyl)-2(5H)-furanone(B2)、butyrolactone Ⅰ 3-sulfate(B3)、butyrolactone Ⅰ(B4)、butyrolactones Ⅶ(B5)、terrein(B6)以及分离自放线菌的 antimycin A11(C1)、daidzein(C2)、genistein(C3)、cyclo-(L-Pro-L-Tyr)(C4)、N-acetyltyramine(C5)、cyclo-(Ala-Leu)(C6)。其中化合物B1为新化合物。对化合物B1-B6进行了抗真菌活性实验,仅B6对白色念珠菌SC 5314和红色毛癣菌4438有微弱活性,MIC值为12.5 μg/mL,B2对须癣毛癣菌4439表现出较好抑制活性,MIC值分别为6.25 μg/mL;C1为抗霉素类化合物,对白色念珠菌SC 5314的MIC值为0.195 μg/mL,对红色毛癣菌4438和须癣毛癣菌4439的MIC值为1.56 μg/mL。该类化合物以antimycin A为代表,其一系列衍生物表现出很好的抗真菌、抗细胞增值等生物活性。本研究从海绵Hyrtios.sp中分离得到系列倍半萜醌类化合物,其中两个新的倍半萜醌类化合物,从真菌Aspergillus terreus中分离得到系列丁烯酸内酯类化合物,其中一个新的含磺酸基的丁烯酸内酯类化合物,以上研究不仅丰富了Hyrtios属海绵和Aspergillus属真菌次生代谢产物的多样性,同时对研究Hyrtios属海绵化学分类学具有一定指导意义。另外,从海洋放线菌(Streptomyces albidoflavus)中分离得到抗霉素(C1)经体外抗菌试验发现具有较好的抗真菌活性,提示其作为抗菌先导化合物的可能,具有进一步开展抗菌机制研究的价值。通过对南海海绵和共附生真菌的研究,进一步揭示了我国南海海域海洋生物和化学成分的多样性,显示出巨大的药用研究潜力,为将来对我国南海海域海洋资源药物活性成分的开发和利用提供一定科学依据。
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