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背景与目的 骨质疏松症(Osteoporosis，OP)是一种以全身性骨量减少和骨的微观结构变化，致使骨脆性增加、骨强度下降而骨折发生危险增加的全身性骨骼疾病，其发病率在世界常见病中已经位居前十位。骨质疏松症骨组织的主要病理表现为松质骨骨小梁变细、断裂和数量减少，皮质骨多孔，骨质结构紊乱等。Apelin是一种可由体内多种组织细胞表达和分泌的内源性多肽，发挥多种生物学功能，包括:调节心血管功能、流体动态平衡、激素水平、神经肽的释放等作用。近期的研究发现脂肪细胞可表达和分泌Apelin。以往有研究指出Apelin可以抑制无血清诱导成骨细胞的cytochromec释放和caspases的活化。因此该研究推测，Apelin通过抑制cytochromec释放和caspase-8，caspase-9和caspase-3的激活，抑制成骨细胞凋亡。OPG/RANK/RANKL系统，表达于成骨细胞和破骨细胞表面，直接参与破骨细胞的活性及功能调节。RANKL诱导破骨细胞成熟的受体，通过RANKL与RANK的结合，进而影响破骨细胞前体。OPG可通过与RANK竞争RANKL，抑制破骨细胞成熟和活化。两者的平衡维持着破骨细胞的活性。目前已证实，多数细胞因子和激素最终都是通过对OPG/RANK/RANKL通路的调控而影响破骨细胞的活性。因此本实验的的目的为探讨Apelin在抑制小鼠成骨细胞凋亡时，对OPG/RANK/RANKL系统产生的影响。 方法 用含10％胎牛血清DMEM培养液对小鼠成骨细胞MC3T3-E1进行培养后，用无胎牛血清的DMEM培养基培养12小时诱导小鼠成骨细胞MC3T3-E1凋亡。12小时后更换无血清的DMEM培养基，并同时加入0nM、0.4nM、1nM、10nM的Apelin进行干预48小时。提取细胞中mRNA及蛋白，分别利用紫外分光光度计及BCA反应法测定样本中mRNA及蛋白浓度。应用RT-PCR测定不同浓度Apelin对无胎牛血清DMEM饥饿培养下小鼠成骨细胞MC3T3-E1的OPG/RANK/RANKL系统中OPG及RANKLmRNA表达。应用Westernblot方法检测MC3T3-E1细胞中OPG及RANKL的蛋白表达。 结果 根据RT-PCR及Westernblot结果显示，Apelin干预组中OPG的mRNA及蛋白表达量较空白组明显升高(p＜0.05)。并且在本实验Apelin浓度为1nM的实验组中，OPG的mRNA及蛋白表达量增加最明显。而对于细胞中RANKL的mRNA及蛋白表达量，各Apelin干预组较空白组明显降低(p＜0.05)。在干预浓度为1nM的Apelin实验组中，RANKL的mRNA及蛋白表达量为各组最少。 结论 1、不同浓度Apelin可促进无血清饥饿诱导的MC3T3-E1细胞中OPG的释放，同时抑制RANKL的表达，其表达量对比空白组有统计学意义。(p＜0.05) 2、在本研究各实验组中，给予的Apelin浓度为1nM时，OPG及RANKL的mRNA及蛋白表达量明显优于其余各组。