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本论文通过五个试验系统研究了大豆虾粉肽的生产制备方法以及大豆虾粉肽对断奶仔猪的生长、肠道生理及免疫功能的影响。
1.试验采用单因素试验设计,以脱皮豆粕(70%)和虾粉(30%)混合蛋白为酶解底物,水解度(DH)和平均肽链长度(APCL)为检测指标,研究了酸性蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶的适宜酶解条件和酶解效果。试验结果表明,酶解体系中的酶浓度(每克底物添加的酶活单位([E],U/g))、底物浓度([S],w/v)、pH、酶解温度(T,℃)和酶解时间(t,h)均显著影响3种蛋白酶对脱皮豆粕和虾粉混合蛋白的酶解效果。酸性蛋白酶的酶解效果最好,其次是碱性蛋白酶,中性蛋白酶的酶解效果最差。酸性蛋白酶对脱皮豆粕和虾粉混合蛋白的适宜酶解条件为:[E]=2000U/g,[S]=9%,pH=3.5,t=3.5h,T=50℃。
2.在酶浓度为2000 U/g、脱皮豆粕和虾粉混合底物浓度为9%、酶解温度为50℃、pH为3.5、反应时间为3.5 h的条件下,采用酸性蛋白酶进行工厂化大豆虾粉肽生产工艺中试的研究,并对所产的大豆虾粉肽的常规营养成分、氨基酸和总寡肽含量进行了测定。采用中空纤维超滤器对肽制剂进行了不同分子量肽的分离测定。试验结果表明,通过包括底物蛋白溶液的配制、预处理、酶解反应、离心和喷雾干燥等处理过程和技术参数等生产工艺,可以生产大豆虾粉肽。大豆虾粉肽的肽得率为45.5%。大豆虾粉肽的粗脂肪、粗纤维、粗灰分和钙含量(0.91%、1.17%、6.81%和0.44%)低于酶解底物,而粗蛋白和磷的含量(50.09%和0.96%)则高于混合底物。大豆虾粉肽的寡肽总含量、分子量小于1000Da和3000Da的寡肽含量分别为34.31%、18.01%和28.12%,分别占大豆虾粉肽总蛋白的67.41%、35.38%和55.25%。
3.试验研究了日粮中分别添加1%和2%大豆虾粉肽等蛋白取代喷雾干燥血浆蛋白粉或鱼粉对21d断奶仔猪的生产性能、常规成分消化率及血液生化指标的影响。选用240头21±2d断乳的皮杜长大四元杂交仔猪,随机分为5个处理组,每个处理6个重复。5种日粮处理分别为:添加2%喷雾干燥血浆蛋白粉和6%鱼粉的对照组,分别添加1%、2%大豆虾粉肽等蛋白取代血浆蛋白粉或鱼粉的试验组。试验结果表明,添加1%和2%大豆虾粉肽等蛋白取代血浆蛋白粉,断奶仔猪的试验后期及整个试验期的日增重和采食量有增加的趋势,但没有达到显著水平(p>0.05)。日粮添加1%大豆虾粉肽取代鱼粉,试验后期和整个试验期的采食量显著提高(p<0.05)。添加1%大豆虾粉肽等蛋白取代鱼粉可显著提高日粮干物质、能量、粗蛋白和钙的表观消化率(p<0.05)。添加1%和2%大豆虾粉肽等蛋白取代喷雾干燥血浆蛋白粉仔猪日粮常规养分消化率没有显著影响(p>0.05)。添加1%和2%大豆虾粉肽等蛋白取代血浆蛋白粉和鱼粉对断奶仔猪的血液生化指标没有显著影响。大豆虾粉肽可以部分等蛋白取代喷雾干燥血浆蛋白粉和鱼粉,对断奶仔猪的生产性能没有显著影响。
4.试验研究了日粮中分别添加2%三种不同类型的小肽产品等蛋白取代喷雾干燥血浆蛋白粉对21 d断奶仔猪的生产性能和血液生化指标的影响。试验结果表明,添加三种不同小肽产品等蛋白取代血浆蛋白粉对断奶仔猪的平均日增重、平均日采食量、饲料转化率、腹泻率和血液生化指标均无显著影响,不同小肽组之间也没有显著差异(p>0.05)。
5.试验研究了日粮中分别添加1%和2%大豆虾粉肽对生长中期仔猪的生长、养分消化率、免疫功能、肠道形态、肠道菌群以及肠道消化酶活性的影响。试验结果表明,与不含喷雾干燥血浆蛋白粉的对照组相比,添加大豆虾粉肽可显著提高仔猪的平均日增重,1%肽组的饲料转化率显著提高;日粮添加大豆虾粉肽和喷雾干燥血浆蛋白粉可显著提高日粮总必需氨基酸回肠末端消化率(p<0.05)。日粮处理对仔猪肠道消化酶活性没有显著影响。与血浆组相比,大豆虾粉肽部分取代喷雾干燥血浆蛋白粉对生长中期仔猪的生长、氨基酸消化率和消化酶活性没有显著影响。日粮中添加大豆虾粉肽对生长中期仔猪的脾脏、腹股沟淋巴结和下颌淋巴结等免疫器官的发育没有显著影响,但可显著提高生长中期仔猪的OVA抗体水平(p<0.05)。小肽能促进生长中期仔猪的空肠绒毛发育,对小肠隐窝深度没有显著影响。添加2%肽可使仔猪的盲肠有害菌数量下降,有益菌数量增加。