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【目的】研究肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)促进胃癌细胞上皮间质转化(EMT)的作用,并探讨其机制。【方法】分离、纯化、鉴定人胃癌,将CAFs和配对的正常成纤维细胞(NFs)分别与胃癌细胞系MKN28进行共培养,研究胃癌细胞的迁移侵袭能力和胃癌细胞是否发生EMT的变化;研究54例胃癌病人的组织芯片和5例原代分离培养的胃癌CAFs中胸腺细胞分化抗原-1(Thy-1)表达;进一步通过sh RNA技术在CAFs中将Thy-1表达进行基因沉默后再与MKN28进行共培养,以证实胃癌相关成纤维细胞是否通过Thy-1介导胃癌细胞发生EMT。【结果】成功分离、纯化并鉴定了人胃癌相关成纤维细胞,分离出的胃癌相关成纤维细胞呈现纺锤形的形态,与NFs形态无显著差异。应用α-SMA m RNA的表达对分离出的原代细胞进行鉴定,发现在CAFs中α-SMA m RNA的表达都比配对的NFs中显著增加,提示从胃癌组织中分离出的成纤维细胞即为胃癌相关成纤维细胞,可以作为细胞模型进行后续实验研究。当CAFs和配对的NFs分别与胃癌细胞系MKN28进行共培养后,胃癌细胞的迁移侵袭能力显著增强,胃癌细胞中E-cadherin表达显著减低,Vimentin、Snail、Slug及MMP-9表达显著增高,表明胃癌细胞发生了EMT。通过54例胃癌病人的组织芯片以及分离的胃癌相关成纤维细胞中的免疫组化研究发现,胃癌基质比非癌组织基质中Thy-1表达量显著增强,阳性细胞形态上呈现为梭形,主要位于癌巢周围,而胃癌组织基质主要细胞成分为CAFs,Thy-1主要在CAFs中出现高表达。在分离出的5例胃癌相关成纤维细胞中,通过检测Thy-1 m RNA及蛋白表达后发现,4/5例样本的CAFs中Thy-1的表达较配对NFs中显著增加,进一步证实了在胃癌相关成纤维细胞中Thy-1存在异常的过度表达。通过sh RNA技术在CAFs中将Thy1表达进行基因沉默后再与MKN28进行共培养,结果发现胃癌细胞的EMT效应发生了减弱,并且其迁移侵袭能力也发生了减弱,EMT现象得到一定程度的逆转,同时Slug蛋白的表达也被部分逆转,提示CAFs中Thy-1可能通过介导胃癌细胞中Slug信号通路从而调控器EMT及迁移侵袭过程。【结论】在胃癌相关成纤维细胞中,Thy-1过表达介导了共培养的胃癌细胞发生EMT和转移侵袭效应。