HLA-DRB1*0701转基因小鼠模型的构建及相关验证

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[目的]  制备携带人类银屑病易感基因HLA-DRB1*0701的转基因小鼠,并对其遗传状况、相关生化指标进行检测,以期获得具有人类银屑病样病理变化特征且能稳定遗传的转基因小鼠模型,为银屑病发病机理和治疗药物的研究提供有效的动物模型。  [方法]  从银屑病患者血液标本中提取HLA-DRB1*0701基因的cDNA序列并构建重组质粒。通过显微注射建立HLA-DRB1*0701转基因FVB小鼠,采用PCR筛选阳性鼠。研究转基因小鼠的遗传稳定性,并利用经典育种方法筛选纯合子。通过RT-PCR方法检测目的基因mRNA水平的表达情况。观察转基因鼠背部皮肤的组织学变化,检测转基因鼠皮肤组织中的CD4、CD8、IL-8和HLA-DR表达。  [结果]  成功构建HLA-DRB1*0701转基因小鼠模型,筛选出含HLA-DRB1*0701基因的纯合子小鼠。通过实验证明,HLA-DRB1*0701转基因小鼠在皮肤组织中有目的基因mRNA水平的表达,小鼠皮肤经HE染色后可以观察到转基因鼠皮肤组织学特征与对照鼠相比较有明显变化,免疫组化方法检测转基因鼠皮肤中CD4、CD8、IL-8和HLA-DR的分布定位基本与人类银屑病病理学改变相似,且含量均显著高于对照组(P<0.05)。  [结论]  成功构建HLA-DRB1*0701转基因小鼠,并通过实验验证了HLA-DRB1*0701转基因小鼠模型与人类银屑病病理变化的相似性,为银屑病动物模型的制备研究提供了理论依据和实验参考。
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