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目的:初步研究大叶茜草素的结构修饰物FFJ-5体外抗肿瘤活性及其对EGFR-AktPKM2信号通路的影响。方法:MTT法检测大叶茜草素及其结构修饰物FFJ-5对A549和HepG2细胞生长活力的影响;流式细胞术检测FFJ-5对A549和HepG2细胞周期的影响;Hoechst33342/PI共染高内涵活细胞成像系统分析FFJ-5对A549和HepG2细胞凋亡的影响;ATP Assay Kit检测FFJ-5对A549和HepG2细胞内ATP生成量的影响;激光共聚焦显微镜检测BCECF-AM(pH荧光探针)孵育后,FFJ-5对A549和HepG2细胞内pH的影响;Western blot检测FFJ-5对A549和HepG2细胞中EGFR、p-EGFR、Akt、p-Akt、PKM2、PARP、Cleaved PARP、Caspase3和Cleaved Caspase3等蛋白表达量的影响;激光共聚焦显微镜检测Rh 123(Rhodamine 123)染色后,FFJ-5对A549和HepG2细胞线粒体膜电位的影响。结果:(1)MTT结果显示:FFJ-5的抗肿瘤活性显著增强,Mollugin在A549和HepG2细胞中的IC50值是分别是FFJ-5的7.8倍、5.6倍。(2)流式细胞术检测结果显示:FFJ-5可呈浓度依赖性的使A549和HepG2细胞的周期阻滞在G2/M期。(3)Hochst 33342/PI共染结果显示:FFJ-5可呈浓度依赖性地诱导A549和HepG2细胞的凋亡。(4)Western blot结果显示:FFJ-5能够呈浓度依赖性的下调蛋白EGFR、p-EGFR、Akt、p-Akt、PKM2的表达。(5)ATP检测结果显示:FFJ-5呈浓度依赖性地抑制A549和HepG2细胞内ATP的生成。(6)BCECF-AM结果显示:FFJ-5可呈浓度依赖性地使A549和HepG2细胞中pH值降低。(7)罗丹明123染色结果显示:FFJ-5可呈浓度依赖性地促使A549和HepG2细胞线粒体膜电位降低。(8)Western blot结果显示:FFJ-5在A549、HepG2细胞中,可激活Caspase3,使Cleaved-Caspase3表达升高、导致PARP加速水解,Cleaved-PARP蛋白表达呈现浓度依赖性地升高。结论:(1)FFJ-5可显著抑制A549和HepG2细胞的生长和增殖,使细胞阻滞在G2/M期,并呈浓度依赖性。(2)FFJ-5可下调PKM2蛋白表达,影响肿瘤细胞的能量代谢和肿瘤细胞生长的酸性微环境。(3)FFJ-5可通过EGFR-Akt-PKM2信号通路抑制肿瘤的增殖并诱导肿瘤凋亡。