论文部分内容阅读
目的：探讨促血管生成素-2(Angiopoietin-2，Ang-2)在胃癌组织中的表达及其与肿瘤病理分期的联系；观察反义Ang-2基因转染对人胃癌细胞SGC-7901的影响。方法：用Western Blot法检测Ang-2蛋白在10例胃癌组织及10例正常胃组织中的表达，用免疫组化法检测53例不同病理分期的胃癌组织中Ang-2蛋白的表达；应用脂质体转染法将既往实验合成[1]的pEGFP-N1-anti Ang-2转染体外培养的人胃癌细胞SGC-7901，以空载体(pEGFP-N1)转染组和未转染组作对照， RT-PCR及免疫组化检测转染后Ang-2基因及蛋白的表达， MTT法和流氏细胞术检测反义Ang-2基因转染对细胞生长和细胞调亡的影响；分别用上述三组细胞注射于裸鼠皮下，对比观察肿瘤生成的速度和肿瘤组织中的血管生成数量。结果：Ang-2蛋白在正常胃组织中不表达，在不同病理分期的胃癌组织中均成呈阳性表达（F=166.76，P＜0.0001）；RT-PCR及免疫组化显示反义Ang-2基因转染组无Ang-2mRNA及Ang-2蛋白的表达，MTT法检测显示反义Ang-2基因转染组细胞体外增殖能力明显低于其他两组（F=10.39，P=0.0024），流氏细胞术检测显示活细胞比率明显低于其它两组（χ2=3188.9805，P＜0.0001）；转染了反义Ang-2基因的胃癌细胞成瘤速度较其它两组明显减慢（第6天（F=10.18，P=0.0005）、第18天（F=7.8，P=0.0021）及第30天（F=79.58，P＜0.0001），肿瘤组织中血管生成的数量较其它两组明显减少（第1周（F=15.18，P＜0.0001）、第2周（F=3.50，P=0.0444）、第3周（F=39.02，P＜0.0001））。结论：胃癌组织中Ang-2的表达与胃癌血管生成及胃癌侵袭能力密切相关；反义Ang-2基因转染可封闭人胃癌细胞SGC-7901中Ang-2mRNA及Ang-2蛋白的表达，抑制其体外生长，促进其凋亡；并对其体外成瘤性及其新生血管的生成有明显的抑制作用。