蛋白质印迹丙烯酰胺—乙烯基吡咯烷酮共聚物微球的研究

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目前蛋白质印迹聚合物研究方面尚存在许多难点有待深入研究。本工作设计并制备了蛋白质印迹丙烯酰胺-乙烯基吡咯烷酮共聚物微球,并研究了其吸附及识别性能,考察了影响蛋白质印迹丙烯酰胺-乙烯基吡咯烷酮共聚物微球吸附及识别性能的各种因素,并对其印迹和识别机理进行了分析。研究结果表明,采用反相悬浮聚合法,以丙烯酰胺(AM)和N-乙烯基吡咯烷酮(NVP)为共聚单体,N,N’-亚甲基双丙烯酰胺为交联剂,牛血清白蛋白(BSA)为模板,可以制备BSA印迹共聚物微球;反应温度、水油比、乙基纤维素分散剂用量、初始共聚单体配比、引发剂用量和加入方式、搅拌速度、水相pH值以及后续洗脱条件等均对粒径等微球结构和形态产生明显影响。吸附实验结果表明印迹微球吸附容量是非印迹微球的3倍多,表明BSA印迹微球具有较高的吸附选择性和识别性能。本文研究了共聚物组成、吸附环境的离子强度及pH值等对印迹凝胶微球的吸附容量和印迹效率的影响;解释了共聚物中NVP含量对微球溶胀率、表层溶胀现象以及吸附容量的影响原理;提出了凝胶基材在对蛋白质进行印迹和识别时的印迹制备与选择吸附的条件相近性原则。
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