氯吡格雷相关药物基因检测方法的建立和临床应用

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氯吡格雷是临床应用最广泛的抗血小板药物,能有效预防或减低动脉血栓及经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后患者心血管事件的发生。众多研究表明遗传因素在氯吡格雷治疗效果的个体差异中起到了重要作用,使药物基因组学在氯吡格雷抗血小板治疗中的作用受到极大关注。然而其临床应用还有一定不确定性。首先缺乏基于药物基因组学的氯吡格雷前瞻性随机临床试验,其次尽管有临床应用指南/总则但缺少临床具体操作细则。国内外尚未见氯吡格雷药物基因与药效在外周动脉疾病(PAD)患者中的研究报道。本研究旨在通过分析CYP2C19和ABCB1基因多态性情况结合血小板功能实验预测经腔内治疗植入支架的中国汉族下肢动脉闭塞症(ASO)患者中期缺血性事件,为临床医师个体化给药方案提供参考依据。本研究参考美国临床生化科学院(NACB)相关要求,验证本实验室自建的CYP2C19、ABCB1基因多态性检测项目的各项性能参数。采用TaqMan-MGB探针荧光PCR法建立CYP2C19、ABCB1基因多态性检测方法检测标本。在准确度、重复性、等各方面对检测方法的性能进行评估。准确性使用Kappa检验评估,重复性使用符合率。结果显示TaqMan-MGB探针荧光PCR法(试验方法)与参考方法(测序法)相比有非常好的一致性(Kappa=1.00);重复性符合率为100%。因此,基于TaqMan-MGB探针荧光PCR法检测CYP2C19、 ABCB1基因多态性可应用于临床检测。临床主要通过测定血小板聚集功能来评价氯吡格雷药效。然而PAD患者腔内治疗(ET)后药物基因指导下的抗血小板药物选择与其疗效检测国内外尚未有文献报道。本研究采用血栓弹力图(TEG)分析检测下肢ASO患者服用氯吡格雷后血小板聚集功能和药物抑制率,并利用TaqMan-MGB探针荧光PCR技术分析患者CYP2C19、ABCB1基因多态性。探索下肢ASO患者CYP2C19、 ABCB1基因多态性与氯吡格雷抗血小板疗效的相关性。本研究发现CYP2C19基因型与高血小板反应(HPR)发生具有显著相关性(P=0.046),是预测HPR发生的独立风险因素(P=0.035; OR=4.861,95% CI 1.119-21.125)。ABCB1基因型则与HPR发生并无显著关联(P=0.835)。为进一步研究在周围血管疾病中CYP2C19、ABCB1基因型与氯吡格雷药效间的相关性奠定了基础,为临床个体化给药方案提供参考依据。中国汉族人群下肢ASO支架术后患者的中期疗效与氯吡格雷基因型相关性尚未见报道。本课研究旨在评估服用氯吡格雷抗血小板的下肢ASO支架术后患者的CYP2C19和ABCB1基因型和血小板功能检测在预测长期缺血事件的临床价值。ABCB1基因型与ET支架术后患者中期预后不相关(P=0.399)。ET支架术后下肢ASO患者中CYP2C19LOF等位基因携带者氯吡格雷抗血小板能力下降、中期预后不良缺血事件风险上升(P=0.008)。CYP2C19LOF等位基因携带者可能在氯吡格雷联合阿司匹林的双联抗血小板治疗方案中不能获益。此外,CYP2C19基因型和吸烟同时是ET术后支架内再狭窄(ISR)的高危风险因素(HRadj=2.688,95% CI 1.366-5.288, P=0.004; HRadj=2.430,95% CI 1.024-5.765, P=0.044)。因此,服用氯吡格雷前进行CYP2C19基因型检测能辅助临床识别缺血事件高危人群。
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