Eales病TH细胞亚群异常及氧化应激的研究

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目的:通过检验不同发病阶段Eales病患者血液中Th1、Th2细胞因子、氧化及抗氧化水平的变化,探讨免疫平衡、氧化及抗氧化损伤机制在Eales病发病过程中的作用,为该病的诊断、治疗及预后判定提供试验参考及理论依据。方法:1.标本选择及处理:纳入符合Eales病诊断标准的30例患者,系首诊于解放军总医院眼科的Eales病人,全部为男性。最小年龄18岁,最大年龄45岁,平均年龄为28.47±8.03岁;随访时间为3-15年,平均为7.1年,其中:NVH组12例,全部为男性,发病年龄为19-41岁,平均为30.5±8.72岁;VH组18例,发病年龄为18-45岁,平均为26.5±12.53岁。对照组10例,均系本院工作人员。选择范围:男性,年龄在18—45岁之间,无自身免疫病及遗传病家族史,无亲缘关系,全身及眼部检查正常。糖皮质激素治疗组:共16例,男性。最小年龄24岁,最大年龄38岁,平均年龄为27.29±4.67岁;其中NVH组激素治疗患者为10例,VH组激素治疗患者为6例,随访时间为3个月。入选病例清晨7时安静、空腹状态下抽取肘静脉血约4ml,1小时内离心(4℃,3000rpm,10min),用微量移液器吸出上层血清约0.5ml,分装于Eppendorf管中,编号,-70℃保存备用,禁止反复冻融。2.本课题采用多功能液相芯片分析系统(luminex100TM),结合传统ELISA、免疫组化及荧光技术,检测了细胞因子(IL-2、4、5、10,TNF-alpha,IFN-gamma)在不同时期Eales病的水平,分析细胞因子在Eales病患者血清中的含量及其对Eales病的影响,探索Eales病发病因素与发生机制,为减少Eales病的发病率和更好地防治Eales病奠定了一定的基础。3.采用SOD、NO试剂盒分析SOD、NO在Eales病患者血清中的含量,分析氧化、抗氧化失衡对Eales病的影响4.统计分析:用SPSS13.0统计软件分析,P<0.05认为有统计学差异,所得结果以(?)±S表示,小数点后保留4位有效数字。单因素分析运用T检验分析与Eales病可能有关的危险因素,logistic回归模型进行多因素分析,筛选可能导致Eales病的危险因素及其危险度的大小。结果:1 IFN-gamma:NVH组Eales病人的血清IFN-gamma含量与正常对照组无显著性差异(P≥0.05);VH组Eales病人的血清IFN-gamma含量显著高于正常对照组(P<0.05);激素治疗病例组Eales病人的血清IFN-gamma含量显著高于正常对照组(P<0.05];NVH组和VH组Eales病人的血清IFN-gamma含量无显著性差异(P≥0.05);NVH组、VH组Eales病人的血清IFN-gamma含量与激素治疗组无显著性差异(P≥0.05)。2IL-10:NVH组Eales病人的血清IL-10含量与正常对照组无显著性差异(P≥0.05);VHEales病人的血清IL-10含量显著高于正常对照组(P<0.05);激素治疗病例组Eales病人的血清IL-10含量显著高于正常对照组(P<0.05);VH组Eales病人的血清IL-10含量显著高于NVH组(P<0.05);NVH组Eales病人的血清IL-10含量与激素治疗组无显著性差异(P≥0.05);VH组Eales病人的血清IL-10含量显著高于激素治疗组(P<0.05)。3 IL-2:不同时期Eales病人血液中IL-2含量与正常对照组两两比较均无统计学意义(P≥0.05)。提示IL-2不随Eales病人病情发展而有明显变化。4.IL-5:NVH组Eales病人的血清IL-5含量与正常对照组无显著性差异(P≥0.05);VH组、激素治疗病例组Eales病人的血清IL-5含量均显著高于正常对照组(P<0.05);VHEales病人的血清IL-5含量显著高于NVH组(P<0.05);NVH组、VH组Eales病人的血清IL-5含量均显著高于激素治疗组(P<0.05)。5.IL-4:NVH组、VH组Eales病人的血清IL-4含量低于正常对照组(P<0.05);激素治疗病例组Eales病人的血清IL-4含量与正常对照组无显著性差异(P≥0.05);VH组Eales病人的血清IL-4含量低于NVH组(P<0.05);NVH组、VH组Eales病人的血清IL-4含量低于激素治疗组(P<0.05)。6.TNF-alpha:NVH、VH组Eales病人的血清TNF-alpha含量均显著高于正常对照组(P<0.05);激素治疗病例组Eales病人的血清TNF-alpha含量与正常对照组无显著性差异(P<0.05);NVH组Eales病人的血清TNF-alpha含量显著高于VH组(P≥0.05);NVH组、VH组Eales病人的血清TNF-alpha含量均高于激素治疗组(P<0.05)。7.SOD:不同时期Eales病人的血清SOD含量与正常对照组均有显著性差异(P<0.05);NVH组Eales病人的血清SOD含量显著高于VH组(P<0.05);NVH组、VH组Eales病人的血清SOD含量均显著低于激素治疗组(P<0.05)。8.不同时期Eales病人的血清NO含量与正常对照组均有显著性差异(P<0.05);激素治疗后血清NO含量与正常对照组差异无统计学意义(P>0.05)。NVH组与VH组Eales病人的血清NO含量组差异无统计学意义(P>0.05);NVH组、VH组Eales病人的血清NO含量均显著低于激素治疗组(P<0.05)。将以上所述的免疫细胞因子赋值后带入多元线性回归模型,得到回归方程Y=6.91+3.22X。假设检验F=11.843,P=0.01,有统计学意义。最终进入回归方程的为TNF-alpha,且Eales病影响依次减弱。结论:1:TH细胞亚群异常在Eales病的发生发展中起着重要作用2:减少Th1型细胞因子的产生,平衡Th1/Th2可减少局部T淋巴细胞聚集,进而可能治疗Eales病和改变病程。3.糖皮质激素治疗Eales病尤其是NVH患者具有显著疗效,但有些细胞因子水平仍偏高,提示疾病仍有复发的可能性。4.氧化应激与Eales病关系密切,清除自由基也可能起到治疗Eales病的功效。
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