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本文对酶荧光法检测奶牛乳中β-羟丁酸的适宜反应条件、乳样前处理方法、准确度和精确度等进行了系统研究，并对乳中与血中β-羟丁酸浓度进行了相关性研究，酶荧光法检测乳中β-羟丁酸的适宜程序为：新鲜乳样先经磷钨酸沉淀法进行脱蛋白处理，取上清液，反应体系β-羟丁酸脱氢酶剂量3U/ml，反应温度37℃水浴10分钟，随后于100℃沸水浴15分钟终止酶促反应，于激发波长340nm、发射波长465nm条件下测定相对荧光强度。该方法的精密度和准确度较高，对不同产奶量奶牛乳中β-羟丁酸浓度检测结果与血中浓度的相关性较高，可作为奶牛酮病早期诊断的依据。