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背景及目的:耐辐射奇球菌(Deinococcus radiodurans,DR)是迄今为止发现的辐射抗性最强的原核生物,是研究DNA损伤与修复的模式生物。研究耐辐射奇球菌特有基因表达的蛋白Ppr M、Ppr I和Ppr A对酵母细胞辐射抗性的影响及Ppr M与Ppr I和Ppr A的相互作用关系,探讨Ppr M在DR中发挥耐辐射作用的分子机制,为研究DR辐射相关蛋白在真核生物中发挥辐射作用奠定基础。实验方法:1.构建p GBKT7-ppr M、p GADT7-ppr I和p GADT7-ppr A载体,分别单转入酵母Y187中,与野生型酵母Y187相比,不同剂量γ辐照后,计算其存活率,并做统计学分析;将p GADT7-ppr I和p GADT7-ppr A载体,分别与p GBKT7-ppr M共转入酵母Y187菌株中,不同剂量γ辐照后,与Ppr I和Ppr A单表达酵母菌株相比,计算酵母Y187菌株的存活率,并做统计学分析。2.将p GADT7-ppr I和p GADT7-ppr A载体,分别与p GBKT7-ppr M共转入酵母Y187中,利用酵母双杂交技术一对一分析Ppr M与Ppr I和Ppr A是否存在相互作用。结果:1.成功构建p GBKT7-ppr M、p GADT7-ppr I和p GADT7-ppr A载体,在未辐照时,Ppr M、Ppr I、Ppr A酵母表达菌株与酵母Y187野生型菌株相比,其生存率无统计学差异;在50-200Gy辐照下,Ppr M、Ppr I、Ppr A酵母表达菌株和与Y187野生型菌株相比,其生存率有显著差异;在100-200Gy辐照下,Ppr M-Ppr I酵母共表达菌株与Ppr I酵母表达菌株相比,其生存率有显著差异;在100-200Gy辐照下,Ppr M-Ppr A酵母共表达菌株与Ppr A酵母表达菌株相比,其生存率有显著差异。2.经过酵母双杂一对一交验证发现,Ppr M与Ppr I和Ppr A共转酵母Y187菌株,X-gal显色反应在8 h内呈现蓝色。结论:1.转化耐辐射奇球菌ppr M基因能够提高酵母的辐射抗性,且在较大剂量辐照下,Ppr M能够与Ppr I和Ppr A产生协同作用。2.Ppr M与Ppr I和Ppr A存在蛋白质-蛋白质相互作用。