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茶黄素是红茶中的重要品质成分,也是饮茶有益健康的重要活性成分,具有明显的抗氧化、清除自由基、杀菌抑菌、抗过敏、防止动脉粥样化、抗辐射等生物学功效。由于茶黄素单体分离存在一定的难度,在一定程度上限制了茶黄素生物学活性的研究,因此寻找一种简单易行、高效低成本的茶黄素单体制备方法,并挖掘茶黄素新的生物学活性是当前业界的研究重点之一。本文在前期研究基础上,以茶多酚为原料,应用体外模拟氧化体系制备高茶黄素含量的茶色素;并进一步应用中压制备色谱制得三种主要茶黄素单体;应用AngII诱导的大鼠血管平滑肌细胞炎症模型,研究了三种茶黄素单体对血管炎症的影响,以期为茶黄素单体的抗炎研究提供理论参考。论文取得的主要结果如下:1.以茶多酚为原料,鲜叶中粗酶液为催化剂,双液相酶促氧化制得高茶黄素(49.9%)含量的茶色素。2.以上述自制茶色素为原料,以反相C18为柱填料,使用MPLC色谱对茶黄素进行分离纯化,用一步分离得到茶黄素(TF1)、茶黄素-3-单没食子酸酯(TF2a)和茶黄素双没食子酸酯(TF3)三种茶黄素单体,纯度分别为94.6%、97.1%和95.6%。三种单体总得率达34.0%,总回收率66.8%。3.应用AngII诱导的大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)炎症模型,通过RT-PCR检测促炎细胞因子mRNA的表达,以EGCG为对照,研究了茶黄素对炎症的影响。发现EGCG(40μM)、TF1(40μM、100μM)、TF3(100μM)均可显著下调由AngII诱导的促炎因子IL-6 mRNA的表达,抑制率分别达到44.3%、22.7%、51.4%、38.4%。4.采用DHE染色法检测原位活性氧(ROS)的产生,结果表明:EGCG(40μM)、TF1(100μM)、TF3(100μM)均可降低由AngII刺激产生的大鼠血管平滑肌细胞中ROS水平。表明EGCG、TF1、TF3可能通过抑制ROS的增加,达到抵抗AngII引起的大鼠VSMC细胞炎症作用。5.在上述炎症模型中,进一步通过Western blotting检测与炎症相关信号蛋白p-IKK、p-p38/MAPK和TLR4蛋白的表达差异,初步探讨了茶黄素抑制AngII诱导的血管平滑肌细胞炎症的作用机制。发现EGCG(40μM)和不同浓度TF1(40μM、100μM)、TF3(40μM、100μM)干预后的p38/MAPK蛋白磷酸化没有显著变化;但EGCG(40μM)、TF1(100μM)和TF3(40μM、100μM)可使IKK蛋白的磷酸化表达分别降低了58.4%、56.5%、66.4%和93.2%。同时EGCG(40μM)和TF3(100μM)干预后还可抑制由AngII诱导的TLR4高表达。上述结果表明EGCG、TF1、TF3抵抗AngII引起的大鼠VSMC细胞炎症反应,不是通过p38/MAPK途径,而可能是通过抑制ROS的产生和NF-κB信号途径来发挥抗炎作用。