【摘 要】
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目的:应用自组装DHL/RADA-16多肽纳米纤维支架凝胶与兔髓核细胞(nucleus pulposus cells, NPCs)联合培养,观察其对NPCs的作用。方法:3周龄健康日本大耳白兔,取其胸腰段椎间盘
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目的:应用自组装DHL/RADA-16多肽纳米纤维支架凝胶与兔髓核细胞(nucleus pulposus cells, NPCs)联合培养,观察其对NPCs的作用。方法:3周龄健康日本大耳白兔,取其胸腰段椎间盘髓核组织,提取培养髓核细胞,用甲苯胺蓝和二型胶原免疫组化法鉴定髓核细胞。等量的细胞培养基DMEM-F12触发多肽溶液DHL-PA+RADA-16-PA(1:1)使其自组装成DHL/RADA-16(实验组),将髓核细胞与自组装纳米材料复合培养(实验组)以及髓核细胞单独培养(对照组),观察自组装纳米材料对髓核细胞生物学行为的影响。结果:原子力显微镜显示DHL/RADA-16形成了纳米级纤维;免疫组化法对髓核细胞的鉴定:成功分离培养髓核细胞,甲苯胺蓝染色(+),二型胶原抗体(+);将DHL/RADA-16(实验组)纳米材料与髓核细胞复合培养,Calcein-AM/PI死、活细胞染色,活细胞数达95%以上,CCK-8间接计数显示DHL/RADA-16可促进髓核细胞的黏附,并且对髓核细胞增殖无毒性作用。结论:DHL/RADA-16纳米材料对髓核细胞有良好的生物相容性,可作为髓核组织工程的生物材料。
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