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抑郁症严重威胁人类的生命健康,这种与应激相关的情绪障碍疾病已经造成极高的致残率和自杀率,使社会和家庭背负巨大的经济负担和精神损失。临床及基础研究都表明大脑内主要的兴奋性传递系统——谷氨酸系统在抑郁症的调控中担负着重要功能,特别是近些年来国内外多个实验室都发现氯胺酮（Ketamine）在半麻醉剂量下就能够起到快速并且持久的缓解抑郁症患者和抑郁动物症状的疗效,这为后续治疗抑郁症和发展抗抑郁药物提供强有力的研究支持。研究表明Ketamine通过阻断离子型谷氨酸受体N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDA受体）起抗抑郁作用,虽然以往的研究认为Ketamine是一种非选择性NMDA受体的通道阻断剂,但越来越多的研究表明在抗抑郁作用中Ketamine特异性地阻断Glu N2B亚型的NMDA受体起到抗抑郁效果。关于抑制Glu N2B起到抗抑郁作用目前认为有两种假说:一种是直接抑制假说,该假说理论基础是临床及临床前实验上均发现抑郁症患者及动物一些脑区例如内侧前额叶皮层（Medial prefrontal cortex,m PFC）谷氨酸水平升高,这提示突触外NMDA受体活动增强,所以Ketamine可能是通过抑制突触外NMDA受体起到抗抑郁作用。另一种是去抑制假说,该假说认为低剂量的Ketamine通过抑制中间神经元上Glu N2B亚型的NMDA受体,使锥体神经元去抑制而起到抗抑郁作用。上述研究均提示Glu N2B亚型的NMDA受体在抑郁症的调节中扮演着十分重要的角色,但其具体机制尚有待探究。已知Glu N2B亚基的膜运输和突触定位受到磷酸化修饰,内质网滞留信号,微管马达蛋白互作等多种方式调控,而酪氨酸磷酸化修饰调控尤为重要。研究表明Glu N2B受体胞内C端的酪氨酸磷酸化位点可以影响受体的膜转运,其中酪氨酸1472位点是Glu N2B上主要的酪氨酸磷酸化位点,其位于一个内化基序（YEKL motif）当中,可以调控受体的膜表面表达,参与突触可塑性、兴奋性神经毒性和痛等病理生理过程。此外,我们实验室先前研究发现Glu N2B酪氨酸1070位点磷酸化能够通过协同调控酪氨酸1472位点磷酸化进而影响受体膜表达,但其对NMDA受体介导的生理病理功能影响尚不清楚。为了探究Glu N2B酪氨酸1070位点的生理病理功能,我们利用CRISPR-Cas9技术获得并繁育Glu N2B Y1070F KI小鼠,通过行为学检测发现KI小鼠在基础水平及14天慢性束缚应激（Chronic restraint stress,CRS）造模后均表现出明显抗抑郁样行为,而KI小鼠海马及杏仁核相关行为均没有受到影响,表现出与1472KI小鼠完全不同的行为表型。生化检测表明在6分钟强迫游泳和14天CRS造模后WT小鼠m PFC脑区酪氨酸1070位点的磷酸化水平显著上升,这说明Glu N2B酪氨酸1070位点磷酸化介导应激相关的过程。此外,通过检测一些与抑郁症相关的脑区,我们发现基础水平上KI小鼠酪氨酸1472位点磷酸化水平仅在内侧前额叶皮层显著降低,这说明通过酪氨酸1070位点调控酪氨酸1472位点的磷酸化水平是有脑区选择性的。进一步运用脑片电生理技术研究发现KI小鼠m PFC脑区第5层锥体神经元突触上NMDA受体功能没有发生改变,突触外Glu N2B亚型NMDA受体功能显著下调,这说明酪氨酸1070位点对定位在突触上和突触外的NMDA受体的功能调控是有差异的。通过对NMDA受体介导的信号进行分析,发现KI小鼠m PFC脑区哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1（Mammalian target of rapamycin complex 1,m TORC1）活性上调,有功能的兴奋性突触数量增加。前人的研究表明基础水平下突触外Glu N2B亚型的NMDA受体激活可以直接抑制由m TORC1介导的突触蛋白合成,我们的数据则显示酪氨酸1070位点磷酸化缺失通过下调突触外NMDA受体的功能,使m TOC1信号通路被活化,由此介导抗抑郁样行为。综合以上研究结果,我们揭示了一种m PFC脑区NMDA受体酪氨酸磷酸化选择性调控介导抑郁症的新机制,为治疗抑郁症提供了新的思路。