N-乙酰-L-半胱氨酸、褪黑素引发对低温胁迫下杂交水稻种子萌发和幼苗生长及基因表达的影响

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水稻原产于热带和亚热带地区,在出苗和幼苗发育的早期阶段易受低温胁迫。我国长江中下游及华南地区在3-4月易出现“倒春寒”,将对水稻种子生产带来严重危害。因此,本文以杂交水稻种子隆香优130和株两优06为材料,研究N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)、褪黑素(MT)引发处理对水稻种子抗寒性的影响。探讨引发处理后的种子经历低温逆境(15℃)11d及随后恢复生长(25℃)3d的发芽率、幼苗生长素质、抗氧化酶活性、谷胱甘肽、脯氨酸含量及抗寒相关基因表达的变化,为提高水稻种子抗寒性提供理论基础和实用技术。主要研究结果如下:1.研究了不同浓度NAC引发对低温逆境下两个杂交水稻品种种子发芽、幼苗生长及基因表达的影响,确定了隆香优130、株两优06种子最佳引发浓度分别为0.1mM、0.25mM。与未引发经历低温逆境的对照比,NAC引发显著提高隆香优130、株两优06低温逆境(11d)后种子发芽率33.2%和7.2%;低温逆境并恢复生长后,显著缩短平均发芽时间1.9d和1.2d,显著提高发芽指数1.2和1.5,显著提高活力指数9.4和8.5;同时低温逆境(11d)后、恢复生长(3d)后,幼苗叶片中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性,还原型谷胱甘肽(GSH)、脯氨酸(Pro)含量均显著提高,超氧阴离子(O2·-)、过氧化氢(H2O2)、丙二醛(MDA)含量显著下降;经NAC引发后,幼苗叶片中与冷信号转导的相关基因(OsCPK24、OsP5CS、OsPRP、OsWRKY45)及与抗氧化酶相关的基因(OsCATa、OsCATb、OsCATc、OsAPXa、OsAPXb)的表达均显著上调。表明,NAC引发增强了幼苗抗氧化能力,减轻氧化胁迫带来的伤害,提高了杂交水稻种子的抗寒性。2.研究了不同浓度MT引发对低温逆境下两种杂交水稻种子发芽、幼苗生长及基因表达的影响。与未引发的种子比,隆香优130和株两优06种子经最佳引发浓度0.2mM MT引发后,显著提高低温逆境(11d)后的发芽率18.0%和16.0%;恢复生长后(3d),显著提高发芽指数1.5和1.6,显著缩短平均发芽时间1.2d和1.5d,显著提高活力指数9.7和11.6,幼苗叶片中抗氧化酶SOD、CAT、APX、POD活性,谷胱甘肽含量均显著提高,H2O2、MDA含量显著降低,同时幼苗叶片中与冷信号转导、编码抗氧化酶相关的基因的表达均显著上调。表明,MT引发通过增强水稻幼苗抗氧化酶活性、增加GSH含量以清除过量的H2O2,减少低温逆境下产生的MDA,提高杂交水稻种子的抗寒性,促进幼苗生长。综上所述,N-乙酰-L-半胱氨酸和褪黑素可以作为有效的引发剂,2种药剂适宜浓度的引发均能通过提高抗氧化酶活性,增加GSH含量、抗寒相关基因表达,促进低温逆境下种子萌发、幼苗早期生长,增强杂交水稻种子的抗寒性。
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