人类FcRn跨肠粘膜传递兔抗体的研究

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免疫乳中不仅含有基本的营养物质,而且还含有丰富的免疫球蛋白,尤其是免疫球蛋白G,对于哺乳动物而言,母源IgG能够跨过胎盘屏障、上皮屏障传递给胎儿和婴幼儿,从而使其获得抵御各种疾病感染的能力,而这一过程需要新生儿Fc受体(FcRn)的参与。另外,IgG的Fc端能够和多种先天免疫细胞(如巨噬细胞、单核细胞、嗜中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、NK细胞等)上的Fc受体结合发挥免疫作用。由于本实验室的前期研究已经证明家兔的IgG和人类FcRn的亲和力最强,甚至超过人类自己的IgG,所以本研究选择牛IgG作为抗原,对兔子进行免疫,制备兔抗牛多克隆抗体IgG,主要以青年健康志愿者为研究对象,通过口服异源抗体,利用补体结合试验检测异源抗体能否跨肠黏膜传递。另外,实验还通过流式细胞仪以及紫外荧光显微镜对实验结果做了进一步的验证。补体结合试验检测结果,血清实验组比对照组有较为显著差异(P=0.015<0.05),同时,白细胞实验组比对照组也有显著差异(P=0.027<0.05),这些数据表明在受试者的血清及白细胞上均存在兔抗牛IgG,即异源抗体能够跨肠粘膜转运而进入到血液循环中,并能够和白细胞上的Fc受体结合。21天后,为追踪异源抗体在体内存在的半衰期,对受试者的血液再一次进行了分析,结果表明,血清实验组较对照组已无显著差异(P=0.073>0.05),而白细胞实验组较对照组仍有显著差异(P=0.044<0.05)。也就是说,受试者的血清中已不存在兔抗牛IgG,但在白细胞上仍然检测到了兔抗牛IgG的存在。为进一步证明该结论,实验选择FITC标记的抗原与被检血液进行孵育反应,利用流式细胞仪监测分析以及荧光显微镜观察,二者均检测到了荧光信号的存在,这些都表明异源抗体不仅能够跨肠粘膜传递,而且能够在机体内存留较长时间。这些实验结果将为免疫乳以及婴幼儿奶粉中添加异源IgG能否被吸收提供依据,也将为异源抗体用于疾病和肿瘤治疗提供一条新的途径。
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