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目的:碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)作为一种神经营养因子,具有细胞保护作用,能够促进神经元存活和再生,被用于治疗各种缺血性心脏病和脑缺血疾病的研究。但是作为一种大分子蛋白,其透过血脑屏障的运输效率很低。纳米脂质体作为一种新型药物载体,对药物活性具有保护作用,能够降低药物毒性,增加靶向位点药物浓度以及提高药物作用时间的特点,在递送药物入脑方面具有广泛的应用前景。通过鼻-脑靶向给药方法,研究以新型纳米脂质体包载bFGF入脑发挥对缺血神经元的保护作用。 方法:(1)应用二次冻干法制备新型纳米脂质体,以扫描电镜观察粒子形态学,通过动态光散射粒径分析仪和Zeta电位/粒度仪分别测定粒径分布和表面电位;通过ELISA试剂盒测定包封率并且用96孔板法培养细胞测定载药纳米脂质体中bFGF的生物活性;(2)分别使用尾静脉注射法和经鼻给药法递送bFGF纳米脂质体,用western-blot法测定脑内bFGF含量,评估纳米脂质体介导bFGF在大鼠脑中的分布情况(3)应用线栓法制备SD大鼠大脑中动脉栓塞的局灶性脑缺血再灌注模型,通过神经功能缺损评估,检验建模是否成功;并在给药治疗后通过神经功能评分,行为学实验,核磁共振成像检测梗死体积以及用免疫组化法和western-blot法测定脑内Akt信号通路蛋白的含量变化,共同评价新型纳米脂质体介导bFGF经鼻入脑对缺血再灌注损伤的疗效。 结果:(1)制备得到的新型纳米脂质体粒子形态圆整,大小均匀,载药粒子平均粒径为128±7.65nm,分散性好,包封率达80%以上,稳定性高,分散良好,能够用作鼻腔给药系统用药。(2) Western-Blot结果表明,新型脂质体结合鼻腔给药能够成功将bFGF递送入脑,并且能够显著提高入脑效率,该载体能够用来递送脑缺血治疗药物入脑。(3)经过bFGF纳米脂质体给药治疗后,神经功能缺损改善,运动能力提高,梗死体积减少,bFGF是通过上调p-Akt表达来实现神经保护作用,并且新型纳米脂质体能够促进bFGF进入缺血性脑内并发挥疗效。 结论:以新型纳米脂质体作为载体经鼻递送bFGF入脑,能够克服血脑屏障限制大分子蛋白入脑,并且保持bFGF在递送过程的活性,增加药物入脑递送效率,发挥对脑缺血再灌注损伤的治疗作用。本研究为开发一种安全有效、无创的治疗脑缺血再灌注损伤的药物递送系统奠定了基础,并且为纳米脂质体走向临床应用提供了更多的支持。