Intermedin预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的相关修复基因的影响

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垂体中叶素Intermedin(IMD)是2004年发现的降钙素相关肽(CGRP)超家族成员,是重要的内源性心血管、肾脏保护因子,在肾脏有很高的分泌,可增加肾血流、尿量,降低肾血管阻力,但其对肾脏的保护机制尚不清楚。本研究采用基因转染的方法使肾组织局部高表达IMD,观察IMD预处理对肾脏IRI修复再生过程中相关修复基因的表达的影响,探讨IMD对肾脏IRI修复过程的影响及机制。目的探讨Intermedin(IMD)预处理对大鼠肾脏缺血再灌注损伤(IRI)修复再生过程中Vimentin等相关修复基因的影响。方法健康雄性Wistar大鼠144只,随机分为假手术组、IRI组、转染空质粒组和转染IMD组。动物右肾切除后,用超声微泡技术将质粒转染入左肾,一周后制作肾脏IRI模型。分别于再灌注1d、2d、3d、4d、7d和14d留取肾组织标本。RT-PCR法检测肾组织Pax-2、ZO-1、Ncam、Wt-1和Vimentin的mRNA表达变化;Western blotting法分析Pax-2、Wt-1和Vimentin蛋白表达变化;ELISIA法检测ZO-1、Ncam的蛋白表达变化。结果(1)IRI组大鼠Pax-2、Zo-1、Ncam、Wt-1和Vimentin在IRI后1d到3d明显表达增加,与假手术组相比具有显著的统计学差异(P<0.01)。4d后基本恢复(P>0.05)。(2)转染IMD组,在IRI后1d到4d的Pax-2、Zo-1、Ncam、Wt-1和Vimentin表达均显著高于同时间点其它3组,与其它3组分别比较均有统计学意义(P<0.01)。(3)IRI组、转染空质粒组和转染IMD组三组上述基因的7d、14d表达和正常组相比差异无统计学意义(P>0.05);IRI组和转空质粒组4d的表达较正常组增高,但无统计学意义(P>0.05)。(4)IRI组和转染空质粒组之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。(5)运用RT-PCR检测上述指标的mRNA表达变化与运用western法或者ELISA法检测的蛋白表达变化趋势一致。结论IMD预处理可通过增加肾脏组织修复基因Pax-2、Zo-1、Ncam、Wt-1和Vimentin的表达,从而对肾组织的修复和再生起到重要作用。
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