肿瘤坏死因子α（tumour necrosis factor-α,TNF-α）在细胞发育、增殖、凋亡、炎症和免疫应答等过程中发挥着重要作用。多种鱼类存着两种甚至三种TNF-α亚型,但不同的TNF-α同分异构体之间存在的功能差异尚不确定,有待进一步探索。在大黄鱼中已有一个TNF-α亚型被报道,命名为TNF-α1。本研究中,我们从大黄鱼（Larimichthys Croea）中克隆得到了一个新的TNF-α同源基因（Lc TNF-α2）,多序列比对发现其与大黄鱼TNF-α1（Lc TNF-α1）氨基酸序列的一致性较低。Lc TNF-α2的开放阅读框（open reading frame,ORF）全长714 bp,编码237个氨基酸。与其它物种TNF-α相似,Lc TNF-α2含有1个由23个氨基酸组成的跨膜区、一个TNF转换酶（tumor necrosis factor-αconverting enzyme,TACE）切割位点(T⁷¹/L⁷²)、一个肿瘤坏死因子家族标志序列(I¹⁰⁸?F¹³⁵)和两个保守的半胱氨酸残基(C³⁹和C¹⁷⁹)。Lc TNF-α1和Lc TNF-α2基因在所有被检测组织中均呈组成型表达,溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）可显著上调二者在脾脏和头肾中的表达水平。在原代大黄鱼头肾单核/巨噬细胞（MO/Mφs）、淋巴细胞（PKL）、粒细胞（PKG）和大黄鱼头肾细胞系（LYCK）中均可以检测到Lc TNF-α1和Lc TNF-α2的表达,灭活溶藻弧菌刺激后,大黄鱼MO/Mφs中Lc TNF-α1和Lc TNF-α2的转录水平显著升高。毕赤酵母（p PICZαA）表达的重组Lc TNF-α1和Lc TNF-α2蛋白（r Lc TNF-α1和r Lc TNF-α2）不仅可以显著增加MO/Mφs中活性氧（ROS）的产生,而且可以促进大黄鱼MO/Mφs中促炎细胞因子（IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α1）的表达。经r Lc TNF-α1和r Lc TNF-α2刺激后,MO/Mφs中一氧化氮（NO）的含量和诱导型一氧化氮合酶（i NOS）基因的表达量均明显增加,但只有r Lc TNF-α1能显著增强MO/Mφs的吞噬功能,上调Lc TNF-α2的表达水平,这些结果表明Lc TNF-α1和Lc TNF-α2在促进单核/巨噬细胞激活方面的功能相似,但存在着一些差异。通过本研究使我们对TNF-α与巨噬细胞功能的关系有了进一步的了解,同时证明了TNF-α在先天性免疫中扮演着重要的角色。