乳房炎是最常见、防治最难、花费最大的奶牛疾病之一,至今仍无有效的根治手段。本实验室将溶菌酶的广谱抗菌作用与基因治疗原理相结合,将人溶菌酶基因克隆入真核表达载体和乳腺定位表达载体,分别以重组质粒作为预防和治疗奶牛乳房炎的基因药物,取得了良好效果,可以作为能替代抗菌素的新型药物加以开发。动物用转基微生物的安全评价包括受体微生物的安全性、基因操作的安全性、动物用转基因微生物的安全性和动物用转基因微生物产品的安全性。本试验采用本实验室自行设计的方法进行重组菌的发酵培养和重组质粒的制备和纯化,以不同剂量的纯化质粒p215C3LYZ,以乳房基部穿刺注射途径注射隐性乳房炎患牛,然后观察试验奶牛的精神状况、食欲、瘤胃蠕动、心率、呼吸、体温等临床表现,结果显示重组质粒注射对奶牛无不良反应;进而建立敏感、特异的质粒残留检测的PCR方法,以从试验采集的血液、心、肝、脾、肺、肾、脑、乳房和肌肉等组织提取的基因组DNA为模板,对注射质粒在牛体内的残留和传播进行检测,结果显示质粒注射后第20天任何组织都为检测阴性;定期采集试验牛奶样、粪、尿、乳腺表皮以及牛舍空气、垫料和水样,采用建立的PCR方法进行检测,结果显示除质粒注射后第一天奶样为检测阳性外,其他组织和时间都为阴性。这些检测结果表明,重组质粒p215C3LYZ具有良好的生物安全性。