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研究背景和目的：表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)是茶叶的主要活性成分之一,它具有抗增殖、抗氧化、抗诱变等作用。近些年研究发现EGCG可促进多种癌细胞系,如前列腺癌细胞、人表皮样癌A431细胞[3]等细胞的凋亡。最近有人报道EGCG通过抑制表皮生长因子受体(EGFR)依赖的AKT和细胞外信号调控激酶(ERK)信号通路,促进永生子宫颈细胞(ECE16)和肿瘤Hella细胞的凋亡。同时,EGCG在内皮细胞、平滑肌细胞和心肌细胞中也起着重要的作用,如EGCG处理可抑制人内皮细胞的分化；通过增加p53蛋白的稳定性和增高NF-κB的活性,促进增殖的平滑肌细胞凋亡；通过抑制STAT1的激活,保护缺氧再灌注诱导的心肌细胞凋亡。但是EGCG在缺氧再灌注诱导内皮细胞凋亡中的作用和分子机理尚未见报道。本研究采用体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs),在EGCG (0,10μM和100μM)和缺氧再灌注处理细胞0-24小时后,用WST-1法检测内皮细胞的增殖；用TUNEL染色观察EGCG对内皮细胞凋亡的影响；应用蛋白免疫印记(Western blot)检测细胞凋亡相关蛋白剪切的半胱氨酸水解酶-3(cleaved caspaspe-3, Asp175);多聚ADP-核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase, PARP); B细胞淋巴瘤/白血病因子-2(B cell lymphoma/lewkmia-2, Bcl-2);Bcl-2相关×蛋白(Bcl-2 associated X protein, Bax);细胞周期相关蛋白,如cyclinD1、p21和p27；丝氨酸/苏氨酸激酶(AKT)；丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)ERK1/2、丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK) p38、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase, JNK);热休克蛋白27 (Heat shock protein 27, HSP27)等蛋白的表达水平。此外,用P13K特异性抑制剂wortmannin、JNK特异性抑制剂SP600125和ERK1/2特异性抑制剂U0126预处理HUVECs,再进行缺氧再灌注和EGCG处理,用蛋白免疫印记检测caspase-3的活性；用TUNEL染色观察内皮细胞的凋亡程度。实验结果：(一)EGCG可明显抑制HUVECs增殖,且呈剂量和时间依赖关系。同时下调细胞周期相关蛋白cyclin D1的表达,而上调p21和p27的表达。(二)EGCG促进缺氧再灌注诱导的HUVECs的凋亡,增高caspaspe-3的活性,降低PARP的活性。(三)缺氧再灌注处理HUVECs后,EGCG可明显降低Bcl-2蛋白表达和上调Bax蛋白表达水平,且呈时间依赖关系。(四)EGCG可抑制AKT及下游蛋白FOXO1/3a和ERK1/2的活性,而激活JNK/c-Jun的信号通路,且呈剂量依赖关系。应用信号通路的特异抑制剂进一步证实EGCG通过AKT、ERK1/2和JNK1/2信号通路促进HUVECs的凋亡。结论：本研究证明EGCG可选择性的抑制AKT和ERK信号通路和激活JNK信号通路,促进缺氧再灌注损伤诱导的内皮细胞生长抑制和凋亡。但是这些结果仍需进一步在动物和人群中验证。