“黄陂荆蜜”的解酒保肝活性与作用机制

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“黄陂荆蜜”(Huang pi vitex honey,HPVH)是产自黄陂(武汉市黄陂区)的荆条蜜,是我国的四大名蜜(荆条蜜、枣花蜜、槐花蜜、荔枝蜜)之一。本文以HPVH为原料研究了其对急性酒精中毒(Acute alcoholism,AAI)小鼠的解酒作用,并对其解酒物质基础进行分析,在此基础上,探究了HPVH对机体中乙醇代谢的两种关键性酶的酶活和表达水平的影响,期望揭示HPVH的解酒作用机制;此外,还研究了HPVH对急性酒精肝损伤小鼠的保护作用。本文主要研究内容和实验结果如下:1.HPVH对AAI小鼠的解酒活性和解酒能力初探:首先建立了测定小鼠血清乙醇含量的气相色谱(Gas chromatography,GC)方法。GC测定AAI各组小鼠血清乙醇浓度,结果表明:中剂量的HPVH组小鼠血清乙醇浓度显著低于模型组(P<0.05),高剂量HPVH组小鼠血清乙醇浓度极显著低于模型组(P<0.01),且与模型组相比,低、中、高剂量HPVH组的血清乙醇清除率分别为16.30%、47.71%、78.37%,证明了HPVH有很好的解酒活性,且存在明显的剂量效应关系。此外,AAI各组小鼠肝脏中ADH和ALDH的活性结果显示:中剂量和高剂量HPVH组的ADH和ALDH活性与模型组相比均显著提高(P<0.05)。说明HPVH解酒机制之一是通过提高肝脏ADH和ALDH这两种关键解酒酶的活性,进而加快乙醇的代谢,降低了小鼠血清中的乙醇含量,达到解酒效果。2.HPVH对AAI小鼠的解酒物质基础研究:为了明确HPVH解酒的物质基础,首先对HPVH的总酚和主要糖类进行了测定,HPVH中的总酚含量为160.81μg/g,果糖、葡萄糖、蔗糖和麦芽糖的含量分别为:38.11%、34.18%、0.63%、0.59%。选取中剂量HPVH作为研究对象,根据中剂量HPVH中果糖、葡萄糖、酚类化合物的含量分别设置不同的实验组,用GC测定不同实验组小鼠SAC。发现含有果糖的几组实验组小鼠SAC与模型组SAC相比均显著降低,(P<0.05),并且这几组组间无显著性差异(P>0.05),而不含果糖的葡萄糖组和酚类化合物组小鼠SAC与模型组SAC相比无统计学差异(P>0.05),因此,可以认为HPVH的解酒物质基础主要是果糖。3.HPVH对AAI小鼠的解酒作用机制:通过测定AAI模型各组小鼠肝脏中ADH和ALDH的酶活、蛋白以及基因的表达量,从分子水平上对HPVH的解酒作用机制进行阐明,结果表明HPVH中果糖是通过提高肝脏中ADH和ALDH的蛋白的表达量、上调ADH和ALDH的m RNA含量,并增加肝脏中ADH和ALDH的酶活,从而加快乙醇在体内的代谢,进而降低了小鼠血清中的乙醇含量。4.HPVH对急性酒精肝损伤小鼠的保护作用:构建急性酒精肝损伤小鼠模型,结合血清和肝脏中生化指标以及肝脏组织病理学切片结果,发现HPVH对急性酒精肝损伤小鼠的保护作用是通过提高机体的抗氧化水平,减轻氧化应激(增加GSH含量、提高SOD活性),缓解脂质过氧化程度(抑制MDA的积累),提高ADH和ALDH活性加快乙醇在体内的代谢,减少乙醇及其代谢产物对肝脏的损害来实现的。
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