重层化培养和表型改变对HuMSCs细胞生长因子分泌的影响

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目的:  越来越多的证据表明间充质干细胞促进创面修复的最主要机制是其旁分泌效应。人脐带间充质干细胞通常的体外培养方法为单层贴壁培养。然而,在体内细胞之间不仅彼此相互接触,同时也附着在细胞外基质中。另外,人脐带间充质干细胞的不同分化表型影响其旁分泌活动。这项研究的目的在于探讨和比较不同培养状态和分化表型的人脐带间充质干细胞与创面修复相关的旁分泌活动在基因表达与蛋白质分泌水平的变化,同时探讨人脐带间充质干细胞的最佳治疗状态。  方法:  人脐带间充质干细胞由剖宫产术后废弃的脐带分离得到华尔通胶组织在体外贴壁分离扩增培养得到。不同培养状态及分化表型的人脐带间充质干细胞的旁分泌因子在mRNA水平及蛋白质水平分别被研究。同时,我们利用组织化学的方法来探究这些不同增殖分化状态的的人脐带间充质干细胞的某些细胞外基质成分的分泌情况(透明质酸,胶原纤维)。  结果:  和单层培养的人脐带间充质干细胞相比,达到重层化状态的的人脐带间充质干细胞及α-SMA表达阳性的人脐带间充质干细胞在基因及蛋白质水平均表达较高水平的与创面修复相关的细胞因子如碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),角化细胞生长因子(KGF),肝细胞生长因子(HGF)和β1转化细胞生长因子(TGFβ1)。重层化的人脐带间充质干细胞及α-SMA(+)的人脐带间充质干细胞表达高水平的细胞外基质分子:一三型胶原及透明质酸。  结论:  体外细胞的重层化培养以及α-SMA(+)表型细胞提高了细胞生长因子的分泌水平以及促进了细胞外基质的合成和分泌。
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