棉花黄萎病是一种具有世界性危害的土传真菌维管束病害,每年在世界范围内会造成数十亿美元的经济损失。因黄萎病菌生存能力强、存活时间长、寄主范围广、转播途径多等特性,很难对黄萎病菌进行有效的防治。棉花黄萎病已经成为我国棉花高产优产的主要限制因素,所以迫切需要找到可以有效防治棉花黄萎病的方法。通过发掘研究棉花黄萎病菌相关致病基因来研究其致病机理,对于研究寻找防治棉花黄萎病的方法具有重要意义。本实验室在前期的研究中通过Pull-down实验找到一个可以和棉花抗病蛋白GbSBT1相互作用的黄萎病菌蛋白VdPHB,这预示着VdPHB蛋白可能在黄萎病菌感染植物时发挥作用。为了研究VdPHB基因在黄萎病菌致病过程中的作用及相关的致病机理,应用同源重组原理构建VdPHB基因缺失突变体。通过研究突变体ΔVdphb的生理生化表型和致病性来分析其基因功能。本研究的实验结果及主要结论如下:通过农杆菌介导的真菌转化实验得到64个候选突变体,随机挑选10个候选突变体,通过基因组和基因表达水平检测得到2个ΔVdphb突变体:ΔVdphb-14和ΔVdphb-16。对野生型Vd991和突变体ΔVdphb的生长速度、胞外酶活性、致病力等方面进行分析,发现生长速度和胞外酶活性没有明显差异。通过致病力分析,发现突变体ΔVdphb致病力显著低于野生型Vd991。同时,在观察感病植株茎秆剖面时发现,突变体ΔVdphb病菌侵染的棉杆维管束没有变为褐色,而野生型Vd991侵染的棉杆维管束变为了褐色。以上结果表明,VdPHB基因虽然没有参与黄萎病菌生长速度和胞外酶活性的调控,但其对黄萎病菌的致病力具有较大的影响,说明VdPHB基因可能在黄萎病菌对棉花植株侵染定殖过程中起作用。