Lats1/p-YAP1通路在大鼠脑外伤后继发脑损伤中的作用机制研究

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目的研究Lats1/p-YAP1通路在大鼠创伤性脑损伤(TBI)所致的神经元凋亡和神经功能障碍中的作用。方法1、收集TBI后6小时,12小时,24小时,48小时,72小时的大鼠脑组织,利用免疫荧光染色和Western Blot技术检测Lats1,p-Lats1,p-YAP1在脑损伤后不同时间点在脑内的表达水平,及这些分子在大脑皮层组织内的表达定位,同时检测脑损伤后发生的神经元的凋亡和血脑屏障的破坏程度。2、大鼠被随机分为假手术组,对照组,TBI组。向对照组和TBI组大鼠脑室内分别注射对照si RNA和Lats1 si RNA,24小时后对对照组和TBI组进行模拟外伤处理。同时对假手术组进行假手术处理。在模拟外伤和假手术处理后24小时取各组同样位置的脑组织,验证干扰效果之后,western blot和免疫荧光染色技术检测p-Lats1和p-YAP1的表达水平,及脑损伤、神经损伤的评估Lats1/p-YAP1通路在大鼠脑外伤后继发脑损伤中的作用与机制。结果我们发现Lats1和YAP1表达在Sprague-Dawley大鼠大脑皮层神经元,TBI后在创伤区域中它们的磷酸化水平显著增加。并且抑制Lats1后不仅p-YAP1的水平下降了,还降低了神经元的凋亡和损伤对神经功能的影响。结论我们的实验结果显示在大鼠TBI模型中通过抑制Lats1/p-YAP1通路可以减轻脑外伤后神经元的凋亡和神经功能缺失。
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