酢浆草的指纹图谱及质量标准研究

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目的:对产自云南、贵州的不同采收季节的13批酢浆草药材样品,在建立其指纹图谱的基础上,进行了酢浆草药材的质量标准研究,以现代分析方法对药材质量控制进行探索及客观的评价。  方法:1.采用高效液相色谱—二极管阵列检测器(HPLC-DAD)建立了酢浆草的指纹图谱,以Diamonsil C18(4.6×250mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-0.1%磷酸水的梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,检测波长为280nm,进样量为10μL;2.以酢浆草对照药材,β-谷甾醇为对照品,对影响薄层色谱的各个因素进行考察,筛选出最佳的薄层色谱条件。3.采用HPLC法建立了以β-谷甾醇为对照的HPLC含量测定方法,以Diamonsil C18(4.6×250mm,5μm)为色谱柱,流动相为甲醇-0.1%磷酸水(98∶2),流速为1.0ml/min,柱温为35℃,检测波长为210nm,进样量为10μl。4.参照《中国药典》2015年版附录的方法建立了酢浆草药材水分、总灰分、酸不溶性灰分及浸出物的检查项。  结果:1.经采用中国药典委员会推荐使用的“中药色谱指纹图谱相似度评价软件”(2010版)分析,共标出酢浆草的13个共有峰,其中12批酢浆草样品指纹图谱的相似度在0.9之上;经采用系统聚类分析方法和主成分分析方法对样品进行分类,13批酢浆草样品可分为七类,其品质受地域性影响差别较大。2.重新建立了酢浆草的TLC定性鉴别方法:取酢浆草超声提取液,以β-谷甾醇和酢浆草对照药材为对照,点于同一硅胶G薄层板上,展开剂为环己烷-三氯甲烷-甲醇-甲酸(8∶8∶1.2∶0.1),显色剂为10%硫酸乙醇溶液,在105℃加热至斑点显色清晰,置日光下及365nm紫外光下检视。该方法与现行TLC方法比较,具有色谱信息丰富、重复性好的特点;3.β-谷甾醇在0.00528 mg/ml~0.08448 mg/ml)呈线性关系,平均回收率为97.69%。RSD为1.46%。本方法适合于酢浆草中β-谷甾醇的含量测定;4.制定出酢浆草药材水分、总灰分、酸不溶性灰分及浸出物的各个检查项的限度。  结论:通过应用本研究成果,可更深层次的评价酢浆草药材的内在质量,为酢浆草药材的采收加工、质量控制、资源利用、临床运用及市场营销等提供理论基础及科学依据。
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