肝脏移植是治疗终末期肝脏疾病的最常用且最有效的治疗手段,而肝脏缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)是肝移植过程中不可避免的病理生理过程,常常会导致严重的移植后并发症,且极大的限制了边缘性供肝的有效利用,因此解决或减轻肝脏IRI,将会使移植后患者和等待移植患者受益。ALDH2(acetaldehyde dehydrogenase 2,乙醛脱氢酶2)是一种醛脱氢酶,其在病理生理状态下,能将外源性和内生性的高毒性醛类氧化成低毒性的乙酸,从而发挥重要的生理功能。近来,已有研究表明ALDH2在氧化应激,乙醇相关疾病中发挥重要的作用。然而,其在肝脏缺血再灌注过程中的作用尚未报道。本研究旨在探讨激活ALDH2对肝脏IRI的保护作用及相关机制研究。第一部分在小鼠的肝脏IRI模型中,通过采用Q-PCR、Western blot、酶活性检测、免疫组织化学等方法,检测肝脏组织中的ALDH2的mRNA和蛋白水平变化,我们发现IRI并不能引起ALDH2的表达变化和分布,进一步检测发现IRI使ALDH2的酶活性明显减低,造成大量的毒性醛类物质的聚集。进一步研究表明应用ALDH2的激动剂Alda-1后,检测发现ALDH2的酶活性明显提高,积聚的毒性醛类物质水平降低,但并不影响ALDH2的表达和分布。第二部分在小鼠的肝脏IRI模型和肝细胞的缺氧复氧(Hypoxia-reoxygenation,HR)模型中,进一步探讨激活ALDH2对肝脏IRI的作用。采用Q-PCR、Western blot、ELISA、荧光、免疫组织化学等方法,检测发现在体内通过给予Alda-1预处理能够明显降低IRI小鼠血清转氨酶水平,减轻肝脏组织病理损伤、肝脏细胞的凋亡程度、肝脏炎症反应程度;在体外实验中进一步验证了给予Alda-1预处理能够改善肝细胞活性,降低肝细胞毒性损伤,减轻肝细胞凋亡,维持肝细胞正常的线粒体膜电位水平,并降低肝细胞ROS的产生。第三部分进一步探讨了ALDH2激活保护肝脏IRI的机制。采用Western blot、透射电镜、小分子抑制剂等方法,检测发现Alda-1预处理能够明显增强细胞的自噬水平,而阻断自噬后能够逆转Alda-1预处理引起的肝脏保护作用,并且我们发现自噬的增加和AMPK通路的激活相关,抑制AMPK的活化能够减轻自噬水平从而逆转Alda-1预处理引起的肝脏保护作用。综上所述,本研究通过建立小鼠肝脏IRI模型,发现肝脏IRI引起ALDH2酶活性的显著下降,采用Alda-1激活ALDH2的酶活性能够明显改善肝脏IRI,其保护机制可能和AMPK介导的自噬增强有关。