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本研究采用深圳市华瑞同康生物技术有限公司生产的胸苷激酶1(TK1)发光法试剂盒,将小细胞肺癌(SCLC)病人及健康查体者做了血清胸苷激酶1(TK1)的检测,并将病人分为局限期和广泛期进行血清胸苷激酶1的检测和比较,然后应用以铂类为主的方案化疗二周期及四周期后再次进行血清胸苷激酶1(TK1)表达水平的检测,并分析治疗前后不同疗效组胸苷激酶1(TK1)表达水平的变化,从而判定血清胸苷激酶1(TK1)的水平在SCLC病人中的诊断及分期中的意义及化疗前后TK1的水平变化与化疗疗效的关系,为临床选择治疗方案及判断预后提供客观及理论依据。
目的:通过对SCLC病人血清中TK1的表达及治疗前后的变化与肿瘤分期、疗效及预后关系的研究,为SCLC的辅助诊断、预后判断、疗效观察、指导用药提供有价值的参考指标。
对象与方法:
1.标本来源:2005年8月-2007年3月山东省肿瘤医院内一科及济宁医学院附属医院呼吸内科、肿瘤科住院的小细胞肺癌(SCLC)病人36人,其中男26例,女10例。平均年龄为54.9±11.3岁。其中局限期病人5人,广泛期病人31人。随机留取健康查体者血清19份,男12例、女7例;年龄23~76岁,中位年龄64岁。
2.TK1表达检测:取活检病理确诊的小细胞肺癌患者化疗前,化疗2周期后及4周期后空腹新鲜血和健康查体者空腹新鲜血,离心后取血清2毫升密闭包装,放置于-80度低温冰箱保存。标本检测前置4℃冰箱解冻,取含一抗的96人份及24人份硝酸纤维膜经点样,洗涤,加入抗体,震荡和漂洗后加ECL发光试剂,将纤维素膜放入CIS-1型化学发光成像分析系统内进行分析。
3.结果计算方法:用TK1标准品的检测数据作标准曲线,三个标准品的TK1含量为横坐标,测定仪对三个标准品的测量数据为纵座标作标准曲线并得到回归曲线,其R值应大于0.95,标准曲线成立。在标准曲线上找到患者血清OD测量值就可以在横座标上得出相应的TK1浓度。
4.统计学处理:采用SPSS13.0进行统计分析,采用t检验和方差分析,以P<0.05为差异显著性。
结果:小细胞肺癌患者血清中TK1表达显著高于健康查体者,小细胞肺癌广泛期患者血清TK1表达高于小细胞肺癌局限期患者血清TK1表达,化疗后不同疗效组TK1变化不同。
1.SCLC组与健康查体组比较:在36例SCLC中,TK1的阳性率为33.3%(12例),TK1均值2.26mg/L,而健康查体者TK1的阳性率为0,TK1均值0.59mg/L(T检验TK1=0.072有显著性差异,P<0.05)
2.SCLC局限期病人与广泛期病人TK1表达水平的比较:在5例局限期病人中,TK1的阳性率为20%(1例),TK1均值1.63mg/L而31例广泛期病人TK1的阳性率为35.4%(11例),TK1均值2.71mg/L(T检验TK1=0.63有显著性差异,P<0.01。)
3.SCLC病人治疗前后不同疗效组TK1变化比较:根据患者经2周化疗后胸部CT瘤块的变化,分为完全缓解组,部分缓解组,稳定组,进展组,TK1在上述不同的疗效组,化疗前后差值均值变化呈递减趋势。相邻两组间做方差分析及T检验有显著性差异。
结论:
1.小细胞肺癌患者血清TK1显著高于健康查体者,TK1是诊断小细胞肺癌的较好的肿瘤标志物。
2.SCLC广泛期病人比局限期病人有更高的TK1表达水平。SCLC病人癌细胞分裂增殖速度愈快,血清中TK1表达的活性也越高,检测到的浓度也越高,籍次TK1表达活性的高低可作为SCLC病程和分期的一个参考指标。
3.SCLC病人经以铂类为主的方案治疗后TK1表达水平变化与病人的疗效有关,将病人化疗前后TK1表达水平变化作为本次疗效判定的参考指标。
总之血清胸苷激酶的浓度作为敏感的肿瘤标志物可以用于诊断、监测疗效及预后或随访的指标。